牛磺酸对苯并芘体外诱导血小板聚集活化功能的影响.pdf

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1、·116·安徽医科大学学报ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2015Jan；50(1)牛磺酸对苯并芘体外诱导血小板聚集活化功能的影响杨国香，徐元宏摘要取健康志愿者外周静脉血并分离血小板，采用随机分1-FITC、IgG1一FITC，PE标记的单克隆抗体CD62P—组的方式将血小板分成6组。通过检测血小板最大聚集率、PE、IgG1一PE、PerCP标记的单克隆抗体CD41aPer-膜表面CD62P及PAC一1阳性表达率，探讨不同浓度的牛磺CP(美国BD公司)；PL一11血小板分析仪，ADP、胶酸(Tau)对苯并芘(BAP)体外诱导血小板聚集活化功能的原诱导

2、剂(江苏英诺华公司)；PH-A型恒温摆动保影响。结果表明，血小板最大聚集率在二磷酸腺苷(ADP)和存箱(潍坊普华公司)；Tau、BAP(美国Sigma公司)。胶原诱导下各浓度BAP-Tau组与溶剂对照组之间比较差异1．2样本制备与处理用枸橼酸纳抗凝真空采血均有统计学意义(P<0．O1)。血小板膜表面CD62P、PAC．1表达率BAP-Tau高浓度组与溶剂对照组比较差异有统计学管采集健康体检志愿者全血190份，抗凝剂与全血意义(P<0．01)。不同浓度的Tau均可拮抗BAP致血小板比例1：9。志愿者纳入标准包括：①年龄18～55功能损伤的作用，且呈浓度梯度性变化。周岁；②血小板计数>1

3、50×10／L或<450×10／关键词苯并芘；牛磺酸；血小板功能；流式细胞仪L；③无吸烟史；④近2周未服用抗血小板类药物；中图分类号R446．9⑤非月经期。将采集后的血样1000r／rain离心l0文献标志码A文章编号1000—1492(2015)(】1—0l16—03min即得富血小板血浆(platelet—richplasma，PRP)；再3000r／min离心10rain，去除部分上清液得到浓牛磺酸(taurine，Tau)是人体内一种条件必需氨缩血小板血浆。取其中10份于采集后30rain内用基酸，具有广泛的生物学作用⋯。研究证实Tau1％甲醛固定处理，作为血小板采集和制备过

4、程中导在体内能抑制血小板聚集降低血小板活化等作用。致CD62P及PAC一1表达阳性率的测定。其余180苯并芘(benzopyrene，BAP)广泛存在于香烟等燃烧份随机分成6组：空白对照组，溶剂对照组(10％产生的烟气中，通过增强体内血小板活化促进动脉DMSO液)、BAP组(10&mol／LBAP液)、BAP—Tau粥样硬化和血栓的形成I4J。血小板可以被胶原、低浓度组(10／xmol／LBAP+1mmol／LTau液)、二磷酸腺苷(adenosinediphosphate，ADP)等诱导剂BAP-Tau中浓度组(10txmol／LBAP+5mmol／LTau诱发聚集，活化后会释放出

5、特异性的血小板膜表面液)、BAP．Tau高浓度组(10I~mol／LBAP+25retool／CD62P和血小板活化复合物PAC-1。但Tau对LTau液)。上述操作均在生物安全柜内进行。将BAP在体外保存血小板中致血小板的聚集和活化制备好的各组血小板样本轻摇混匀后，置血小板振功能怎样，目前很少有报道。根据研究J，BAP选荡保存箱内(22±2)℃保存24h。用10Ixmol／L、Tau选用正常成人血浆浓度值上限约1．3血小板膜表面CD62P和PAC一1阳性表达率5倍值(1、5、25mmol／L)作为实验浓度梯度，观测的测定采用FACSCalibur流式细胞仪进行检测。Tau对BAP体

6、外诱导血小板功能的影响。检测管：在FCM专用上样管中依次加入CD62P．PE、1材料与方法PAC一1-FITC、CD41a—PerCP、血小板悬液；同型对照管：依次加入IgG1-PE、IgG1一FITC、CD41a—Per—1．1主要仪器和试剂FACSCalibur流式细胞仪和CP、血小板悬液；轻轻混匀置室温避光反应15rain，CellQuest分析软件，FITC标记的单克隆抗体PAC-用PBS洗一次，加入1％甲醛1ml避光固定15rain，24h内上机检测分析。以CD41a—PerCP和侧散射光2014—09—12接收散点图设血小板门，用同型对照管设定阴性群体，测基金项目：安徽省

7、科技创新公共服务平台项目(编号：PT20081011)作者单位：安徽医科大学第一附属医院检验科，合肥230022定血小板膜表面CD62P和PAC．1阳性表达率作者简介：杨国香，女，主管检验师，硕士研究生；(％)。见图1。徐元宏，男，教授，主任技师，责任作者，E-mail：xyhong19641．4血小板聚集功能测定采用PL．11血小板分@163．com析仪进行检测。将各组浓缩血小板按仪器流程要求安徽医科大学学报ActaUniversitatisMedici