泰州地区犬血清弓形虫抗体间接血凝与胶体金试纸对比调查研究.pdf

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1、江苏农业科学2013年第4l卷第7期一211一卓国荣，周红蕾，张斌，等．泰州地区犬血清弓形虫抗体间接血凝与胶体金试纸对比调查研究[J]．江苏农业科学，2013，41(7)：211—212泰州地区犬血清弓形虫抗体间接血凝与胶体金试纸对比调查研究卓国荣，周红蕾，张斌，贺生中，王传锋，郑晓亮(1．江苏农牧科技职业学院宠物科技学院，江苏泰州225300；2．江苏农牧科技职业学院泰爱牧宠物医院，江苏泰州225300)摘要：运用间接血凝与胶体金试纸2种方法对比调查了泰州地区宠物医院就诊犬、宠物市场销售犬与农村家养土犬血清弓形虫抗体阳性率，并对2种方法检测结果进

2、行分析比较。结果表明，泰州地区宠物医院就诊犬、宠物市场销售犬、农村家养土犬、总样本血清间接血凝检测阳性率分别为9．63％、4．71％、10．00％、8．21％，胶体金试纸检测阳性率分别为10．37％、4．71％、11．67％、8．93％，数据显示泰州地区土犬与宠物医院就诊犬弓形虫抗体阳性率较高，胶体金试纸检测敏感性高于间接血凝法，但两者差异不显著。关键词：犬；血清；弓形虫抗体；间接血凝；胶体金试纸；调查研究中图分类号：$858．292文献标志码：A文章编号：1002—1302【2013)07—0211—05弓形虫病是由刚地弓形虫引起的以孕妇(畜)流

3、产、弱1．1．2血清样本280份血清样本随机采集于江苏省泰州胎、畸胎、死胎和儿童(幼畜)生长受阻、死亡等为特征的一种市泰爱牧宠物医院就诊宠物犬、泰州市宠物市场销售犬与泰人畜共患病⋯。该病广泛存在于世界各地，弓形虫宿主范围州地区农村家养土犬，其中采集宠物医院就诊犬血清135份，广泛，人和犬为其中间宿主，都存在一定的感染率，据报道统采集宠物市场犬血清85份，采集农村土犬血清60份，所采集计，我国不同地区、不同年份犬血清弓形虫抗体阳性率在血清分装后登记、编号、标记。1．75％～46．67％不等；另有调查表明，养犬与人弓形虫1．2方法感染存在直接的联系；犬

4、的弓形虫感染可以明显增加人感染用弓形虫抗体间接血凝(IHA)试剂盒与胶体金试纸条平弓形虫的机会；感染患犬是人畜共患弓形虫病的重要传行对比检测所采集的280份犬血清样本。染源之一。目前，国内外学者已建立多种检测弓形虫抗原或1．2．1弓形虫抗体间接血凝(IHA)检测试剂盒检测方法抗体的方法，如病原学检测、间接血凝检测、间接免疫荧光试在96孔、110。V型血凝板上，用移液器加稀释液75L／孔，每验、酶联免疫吸附试验、PCR检测、胶体金试纸检测等。鉴于个待检样品加8孔。每块板上均设标准阳性、阴性血清对照，弓形虫病具有重要的公共卫生意义，选择合适的方法检测弓

5、其中阳性对照加8孔，阴性对照加4孔。取相应的血清25形虫感染直接关系到人和动物的健康。因此，本研究在2011，加入第1孑L，混匀后取出25L加入第2孔并混匀，同样年7月至2012年6月期间采用间接血凝与胶体金试纸2种自第2孔取出25L加入到第3孔中混匀，以此方法进行稀方法对比调查泰州地区犬血清弓形虫抗体阳性率，以期引起释。待检血清样品和标准阳性血清稀释至第7孔，并自第7宠物饲养者重视，并对今后检测与防治犬弓形虫病提供依据。孔中弃去25，标准阴性血清稀释至第3孔，并自第3孔中弃去25L。每排的最后1孔为稀释液对照。最后，每孔均加1材料与方法人25诊断

6、液，将反应板置于微量振荡器上振荡2rain取1．1材料下，盖上同样大小的洁净玻璃板，静置于37℃恒温培养箱中，1．1．1主要试剂与材料弓形虫抗体间接血凝(IHA)检测2—3h后观察结果。以50％红细胞凝集(++)的最高稀释试剂盒：诊断抗原、标准阳性血清、标准阴性血清(稀释液，批倍数判定为该血清的凝集价(效价)。在阳性对照血清滴度号20110529，购自中国农业科学院兰州兽医研究所。不低于1：1024(第5孔“++”)，阴性对照孔血清除第1孔弓形虫抗体胶体金试纸条：批号JL101212，广州健仑生允许存在前滞现象(+)外，其余各孔及稀释液对照孔均为“

7、物科技有限公司生产。一”的前提下，对待检血清进行判定，否则重做。血清抗体110。V型血凝板，1O～100可调移液器，加样头，微型效价≥1：64者判为阳性；效价≤1：64者判为阴性。振荡器，恒温培养箱。1．2．2弓形虫抗体胶体金试纸条检测方法在检测卡的加样孔内加入100待检血清样品。将检测卡平放于桌面上，在室温下静置5—20rain内判定结果。超过20min的结果只收稿日期：2012—12—23能作为参考。基金项目：江苏农牧科技职业学院青年基金(编号：QN201114)。作者简介：卓国荣(1980一)，男，湖北襄阳人，硕士，讲师，研究方向为结果判定方

8、法见图1。小动物疾病与小动物影像技术。E—mail：55165688@qq．corn。阳性：在观察孔内，检测线区(T)及对