胶体金法与酶联免疫吸附试验法检测乙型肝炎表面抗原的结果比较.pdf

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1、实用医技杂志2013年lO月第2O卷第1O期JoumMofPractica1Medica1Technique8，Oct0ber2013，v01．20，No．10。1095。胶体金法与酶联免疫吸附试验法检测乙型肝炎表面抗原的结果比较江苏省南京市江宁区第二人民医院(211103)俞胜琴乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)引起的传染病，其临粒结合抗HBsAg抗体反应，然后，混合物随之在毛细效应下床诊断依据之一是对血清标志物之一的乙型肝炎表面抗原向上层析。如是阳性，胶体金抗体在层析过程中先与标本中的(HBsAg)的测定。目前临床实验室检测HBsAg最常用的方法

2、HBsAg结合，随后结合物会被固定在膜上的抗HBsAg抗体结是胶体金法和酶联免疫吸附试验(ELISA)法，ELISA法需要合，在测试区内会出现一条紫红色的条带。这条带是HBsAg一定的设备、费时、操作繁琐、影响因素多，而胶体金法操作抗体一HBsAg-金标粒子的复合物在膜上结合形成的。如是阴简便快速，不需要任何设备。为了在今后的实际工作中正确性，则测试区内将没有紫红色的条带。无论HBsAg是否存在选择检测方法，我们用上述2种方法对407例血清标本进行于标本血样中，一条紫红色的条带都会出现在质量控制区内。HBsAg检测，现介绍如下。质量控制区内所显现的紫

3、红色条带是判定是否有足够标本，1资料与方法层析过程是否正常的标准。ELISA法检测HBsAg，采用的是双1．1标本来源：407例标本均来自我院门诊患者，’清晨空腹抗体夹心法酶联免疫吸附试验原理。在微孔条上预包被纯化静脉采血3-5mL，待血液自然凝固后，3000r／min离心5乙型肝炎表面抗体(HBsAb)，配以酶标记抗体(HBsAb．HRP)min，分离血清进行检测。及TMB显色剂等其他试剂，检测HBsAg。1．2试剂与方法：ELISA法检测HBsAg试剂盒购于北京万泰本组结果表明：ELISA法与胶体金法2法的符合率为生物药业股份有限公司，胶体金试剂

4、盒购于艾康生物技术99．3％，2种方法检出差异无统计学意义。以ELISA法为标准(杭州)有限公司，2种试剂均在有效期内使用，严格按照说明的胶体金法的漏检率为0．7％，分析造成胶体金法的漏检原因书进行操作和结果判断。可能有：①2法的灵敏度：胶体金法的灵敏度为1ng／mL，而1．3统计学处理：统计数据采用配对两分类资料的检验，ELISA法的灵敏度为0．5ng／mL。②胶体金法层析的速度：如以P<0．05为差异有统计学意义。果层析的速度过快，HBsAg与试剂条上的HBsAb未能结合，2结果就超过检测线，或因层析过快，导致对照线很快显示，弱阳性2种方法测定的

5、407例标本中，ELISA法检出阳性24标本还未显示，也可能导致漏检。③人为因素：由于工作人员例，阳性率5．9％；胶体金法检出阳性2l例，阳性率5．2％。2操作不熟练，观察结果经验不足，观察时间过短，责任心不强，种方法均为阳性21例，均阴性383例，符合率99．3％[(21+工作配合不好等均会造成漏检。④试剂储存方面：试剂要现用383)／407]，胶体金法漏检率为O．7％(3／407)。2种方法检出差现取，及时密封保存，防止受潮。否则，结果受到影响，产生漏异无统计学意义(22=1．333、P>0．05)，见表1。检。⑤标本因素：少数标本可能存在乙型肝

6、炎病毒变异或亚型差别而不易检出，造成阳性漏检。表1胶体金法与ELISA法结果比较胶体金法检测HBsAg具有较高的特异性，同时方便、快捷，不需要任何设备等优点，适用于基层医院、急诊、无偿献血现场及个体诊所等。又因胶体金法具有一定的假阴性率，对于临床诊治，特别是输血及术前检查等，仍以ELISA法为佳。但ELISA法也有不足之处，如果标本溶血时，可能会导致假阳性【lI，或因血清中HBsAg含量过高时，易出现“带现象”，从观察单个标本检测时间，ELISA法检测时间1．5h，胶体而导致假阴性的漏检日。因此，在实际工作中，应科学合理地金法有l5例标本在10min

7、内出现阳性，另6例在10～20min选择检测方法，必要时可以同时使用胶体金法与ELISA法检内出现阳性。根据胶体金法试剂盒说明，测试结果在20min测HBsAg，以弥补相互的不足，提高阳性检出率，降低漏检内读取，20min以后判定结果无效。3例弱阳性标本在20min率，保证检测结果的正确性。以后出现检测线，判定为阴性。参考文献3讨论[1】孙艳霞．分析标本溶血时ELISA法检测血清乙型肝炎表面抗胶体金法检测HBsAg，采用高度特异的抗原抗体反应及原的影响．标记免疫分析与临床，2009，16(4)：253．254．免疫层析分析技术，试剂盒被预先固定于膜上

8、测试区的抗[2】姜友珍，张弘，莫碧嫒，等．3种方法检测乙型肝炎病毒表面HBsAg抗体和包被在金标垫上抗HBs