肿瘤相关巨噬细胞对皮肤恶性黑素瘤细胞A375生物学行为的影响.pdf

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1、中华皮肤科杂志2014年9月第47卷第9期Chin．JDermat0LSeptenaber2014．VoI．47．N0．9619·论著·肿瘤相关巨噬细胞对皮肤恶性黑素瘤细胞A375生物学行为的影响殷芳吴飞陈佳章楚光宋宁静【摘要】目的探讨肿瘤相关巨噬细胞对皮肤恶性黑素瘤细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法取对数生长期人单核细胞株U937，采用佛波酯诱导48h后，分为3组，M‘p组(继续用佛波酯诱导48h)、M1组(用25mg／LLPS诱导48h)、M2组(用15g，LIL一4诱导48h)。酶联免疫吸附试验检测各组巨

2、噬细胞上清中IL一12p70和IL一10表达水平。建立巨噬细胞与恶性黑素瘤A375细胞体外共培养体系，分别设单独培养组、Mqo组(A375细胞和M‘p巨噬细胞共培养)、M1组(A375细胞和M1型巨噬细胞共培养)、M2组(A375细胞和M2型巨噬细胞共培养)，分别运用噻唑蓝法、Transwell小室法观察不同激活途径的巨噬细胞对A375细胞增殖、侵袭、迁移等生物学行为的影响。结果增殖实验显示，共培养48、72h后M‘p巨噬细胞、M2型巨噬细胞显著促进A375细胞的增殖，M1型巨噬细胞抑制A375细胞的增殖，各

3、处理组间两两比较，差异有统计学意义(均P<0．05)，共培养24h后各组间两两比较A375细胞增殖率差异无统计学意义(P>0．05)。侵袭实验显示M2组和Mqo组穿过Transwell膜的A375细胞数量(147．00-1-7．92、113．22±8．15)较单独培养组(84．11±6．07)明显增加(P<0．05)，M1组穿膜细胞(56．44±7．55)明显减少(P<0．05)。迁移实验显示M2组和Mqo组穿过Transwell膜的A375细胞数量(198．33±8．22、156．00±8．83)较单独培养

4、组(123．89±7．01)明显增加(均P<0．05)，M1组穿膜细胞(97．11±6．75)明显减少(P<0．05)。结论IL一4激活的M2型巨噬细胞对A375细胞的增殖、侵袭和迁移可能起促进作用；脂多糖激活的M1型巨噬细胞对A375细胞的增殖、侵袭和迁移可能起抑制作用。佛波酯诱导的巨噬细胞更倾向于M2型巨噬细胞表型。【关键词】黑色素瘤；细胞系，肿瘤；巨噬细胞；细胞增殖；细胞运动Efectsoftumor-associatedmacrophagesonthebiologicalbehaviorofA375h

5、umanmalignantmelanomaceHsYinFang~WuFei，ChenJia，ZhangChuguang,SongNingiing．*ShanghaiSkinDiseaseHospital,AnhuiMedicalUniversity,Shanghai2DD443．inaCorrespondingauthor：SongNingjing,Email：songnj一10@163．com【Abstract】ObjectiveToevaluatetheeffectsoftumor-associated

6、macrophagesontheproliferation，invasionandmigrationofhumancutaneousmalignantmelanomacells．MethodsCulturedU937humanmonocyticcellsatlogarithmicphasewereclassifiedintothreegroupstobepretreatedwithphorbolesterfor48hoursfollowedby48-houractivationbyphorbolester(M

7、q0polarization)，lipopolysaccharide(IJPS)at25mg／L(M1polarization)，andinterleukin(IL)．4at15g／L(M2polarization)respectively．Then,enzyme．1inkedimmunosorbentassay(ELISA)wasperformedtodeterminethelevelsofIL．12p70andIL．10inthesupernatantoftheseactivatedcells．A375h

8、umanmalignantmelanomacellsweredividedintofourgroupstobeculturedaloneorwithM‘D．．M1．andM2．polarizedmacrophagesrespectively．Afteradditionalculturefordifferentdurations(24，48and72hours)，methylthiazolyltetr