抗体效价测定操作规程.doc

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1、抗体效价测定操作规程操作步骤：一．IgG类1.IgG类抗体效价滴定，须取适量血清200μL加等体积2—Me溶液混合，封口，置37℃水浴箱作用60分钟，先稀释血清：200μL病人血清+600μL生理盐水备用排列6支试管按顺序编号。第二管开始加样枪各加生理盐水200，在第一管和第二管中各加入稀释血清200μL，第二管混匀后移出200μL转至第3管，以同样操作稀释第6管，从第6管吸出200μL暂时保留在另一试管中（可作为第7管），以备必要时作进一步稀释。这样从第1管到第6管的血清稀释度依次是1：8，1：16，1：32，

2、1：64，1：128，1：256；2.加红细胞悬液（自配红细胞悬液同反定型试剂）每管各加2%相应红细胞悬液200μL，混匀。（如待检血清抗体为抗A，则加入A型标准红细胞悬液；如待检血清抗体为抗B，则加入B型标准红细胞悬液；如待检血清中既有抗A又有抗B，则倍量稀释两份血清，一份加入A型标准红细胞悬液，另一份加入B型标准红细胞悬液；3.先直接离心观察结果，之后再每管分别加入凝聚胺试剂盒中的R1液3d，混合30S均匀后，再各加R2溶液1滴，并混合均匀，离心后再加R3液2滴，操作方法同凝聚胺交叉配血法，然后判读结果。通常

3、以肉眼观察到的第一个“±”的凝集管作为判断的终点，终点血清稀释度的倒数为效价（Titer），或称滴度。一．IgM1.血清连续倍量稀释法先稀释血清：100μL病人血清+700μL生理盐水备用，排列6支试管按顺序编号。第二管开始到第六管加样枪各加生理盐水200μL，从第一管和第二管中各加稀释血清200μL，第二管混匀后移出200μL转至第3管，以同样操作稀释至第6管，从第6管吸出200μL暂时保留在另一试管中（可作为第7管），以备必要时作进一步稀释。这样从第一管到第6管的血清稀释度依次是1：8，1：16，1：32，1

4、：64，1：128，1：256；2.加红细胞悬液（自配红细胞悬液同反定型试剂）每管各加2%相应红细胞悬液200μL，混匀。（如待检血清抗体为抗A，则加入A型标准红细胞悬液；如待检血清抗体为抗B，则加入B型标准红细胞悬液；如待检血清中既有抗A又有抗B，则倍量稀释两份血清，一份加入A型标准红细胞悬液，另一份加入B型标准红细胞悬液；此为IgM类盐水抗体可立即离心后观察。