棉蚜保幼激素环氧水解酶基因克隆及表达初步分析.pdf

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1、棉花学报CottonScience2014，26(4)：326-333棉蚜保幼激素环氧水解酶基因克隆及表达初步分析徐素平-一，张帅，吕丽敏，雒瑶瑜，王春义，李春花，崔金杰，雷朝亮(1．中国农业科学院棉花研究所帛花生物学国家重点实验室，河南安阳455000；2．华中农业大学／湖北省昆虫资源利用与害虫可持续治理重点实验室，湖北武汉430070)摘要：保幼激素环氧水解酶(Juvenilehormoneepoxidehydrolase，JHEH)在保幼激素(Juvenilehormone，JH)的代谢途径中起重要的降解作用。为初步分析JHEH在棉蚜(AphisgossypiiGlover

2、)生长发育中可能存在的功能，本研究通过转录组测序并结合RACE技术，克隆AgosJHEH基因，其开放阅读框为1401bp，编码466个氨基酸．预测蛋白质分子量为52．6kDa，等电点8．19。N末端存在由20个氨基酸组成的疏水性信号肽序列，存在催化三联体Asp(230)、Glu(408)、His(437)氨基酸残基以及阴氧离子洞Tyr(304)、Tyr(378)和HGWP花样结构氨基酸残基，与豌豆蚜氨基酸序列有很高的同源性。RT—qPCR结果表明AgoMHEH在棉蚜无翅若虫3、4龄表达量显著低于其他龄期．在无翅成虫中各生命时期没有显著差异，有翅成虫腹部显著低于翅中的表达量。本研究

3、首次对AgosJHEH进行结构分析及功能预测，为深入理解其对棉蚜JH滴度的调控机制及开发新型杀虫剂奠定基础。关键词：棉蚜；保幼激素环氧水解酶；基因克隆；表达中图分类号：$435．622文献标志码：A文章编号：1002．7807(2014)04—0326．08CloneandExpressionAnalysisofAphisgossypiiGloverJuvenileHormoneEpoxideHydrolaseGeneXuSuping，ZhangShuai，LyuLimin，LuoJunyu，WangChunyi，WangChunhua，CuiJinjie，LeiChao—lia

4、ng~(1．StateKeyLaboratoryofCottonBiology／InstituteofCo~onResearch，ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Anyang,Henan455000，Chin~2．HubeiInsectResourcesUtilizationandSustainablePestManagementKe)Labomto~,Instituteofln—sectResources,HuazhongAgriculturalUniversity,Wuhan,Hubei430070，China)Abstract：Ju

5、venilehormoneepoxidehydrolase(JHEH)isconsideredoneofthemostimportantenzymesindegradedjuvenilehor—mone(JH)．Inthispaper，AgosJHEHwasclonedfromAphisgossypBGloverbyusingtheRNA—seqtranscriptomedatasetandRACEstrategyinordertoinvestigatethefunctionofJHEHinA．gossypiigrowthanddevelopment．Theopenreading

6、framewas1401bplong，andencoded466aminoacids．Itspredictedmolecularmassandisoelectricpointwas52．6kDaand8．19，respec—tively．Accordingtosignalpeptideprediction，AgosJHEHhadahydrophobicsignalsequencewith20aminoacidsinN—terminalregion．TheresiduesAsp(230)，Glu(408)，His(437)thatformthepotentialcatalytict

7、riad，andtheresiduesTyr(304)，Tyr(373)，andtheHGWPmotifthatconstitutethepotentialoxyanionholewerefoundinthededucedaminosequences．TheAgosJHEHaminoacidsequenceshavehighhomologytoJHEHfromAcyrthosiphonpisum(Harris)．Wealsousedreal—timequantitativePCR