云南烟草中烟草花叶病毒株系比较与分析.pdf

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1、106中国烟草学报2013年12月第19卷第6期云南烟草中烟草花叶病毒株系比较与分析秦西云，卢训，方琦，尹跃艳，丁铭，张仲凯1云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所，云南省农业生物技术重点实验室，农业部西南农业基因资源与种质创制重点实验室，昆明市学云路9号650223；2云南省烟草农业科学研究院，昆明市圆通街33号650031摘要：利用TAS．ELISA方法对采自云南不同烟草种植区的710份花叶病样进行检测，其中546份样品与TMV抗体呈阳性反应。根据地理分布的差异，选择了38个代表性分离物进行T

2、MV外壳蛋白基因的IC—RT-PCR扩增、克隆和测序。测序分析表明，38个TMVcp基因核苷酸序列相似性在95％～100％之间，其推导的氨基酸序列同源性为97．5％～100％。云南不同TMV分离物与TMV-U1、TMV-Fujian核苷酸相似性大于90％，其系统关系与TMV-U1和TMV-Fujian分离物聚为一簇，研究表明云南38个烟草分离物均属于TMV-U1株系。关键词：烟草；烟草花叶病毒；株系doi：10．39690．issn．1004-5708．2013．06．0017中图分类号：S432．

3、41文献标识码：A文章编号：1004-5708(2013)06-0106-08ComparisonoftobaccomosaicvirusstrainsisolatedfromtobaccogrownindiferentareasinYunnanProvinceQINXiyun，LUXun，FangQi，YinYueyan，DINGMing，ZHANGZhongkai1InstituteofBiotechnOlOgyandGermplasmResources，YunnanAcademyofAgric

4、ultura1Sciences，KeyLaboratoryofYunnanAgriculturalBiotechnology，KeyLaboratoryofSouthwesternCropGeneResourcesandGermplasmInnovation，MinistryofAgriculture，Kunming，650223，Yunnan，China；2YunnanAcademyofTobaccoAgriculturalResearch，Yuxi，653100，Yunnan，ChinaAbst

5、ract：710samplesoftobaccoplantsshowingmosaicsymptomwerecollectedfromdifferenttobacco—growingareasinYunnanprovince．546ofthe710samplesweredetectedTMVantigenpositivebyTAS—ELISA．Accordingtogeographicaldistribution．38isolateswereamplified．clonedandsequencedb

6、yIC·RT-PCRforTMVcoatproteingene．Resultshowedthatnucleotidesequencesforcoatproteinofthese38isolateswere95％to100％similarwhileaminoacidsequencesweresimilar97．5％～100％．ThesimilarityamongdiferentTMVisolatesinYunnanandTMV-U1，TMV-Fujianwererelativelyhighinnucl

7、eotidesequencesofcoatproteingene．ThephylogenetictreeofTMVisolatesshowedTMVisolatesinYunnansharecertainevolutionaryrelationshipwithTMV-U1strain．Keywords：tobaccoplant；tobaccomosaicvirus；strain烟草花叶病毒(Tobaccomosaicvirus，TMV)是围，可侵染包括30个科的310多种植物『l】。TMV基烟草花叶

8、病毒属的代表种，该病毒具有较广的寄主范因组全长6395nt，为单链正义RNA，基因组共编码4个ORF『2]，其中外壳蛋白基因(coat—protein，CP)基金项目：中国烟草总公司重点科技项目(110200902065)，云南省是病毒分类相关基因『3]。在不同的寄主上TMV有许公司科技计划项目(2010YN19)作者简介：秦西云(1963一)，主要从事烟草病虫害防控技术研究，多株系，在我国主要有TMV-U1、TMV-U2、番茄株Email：xyqin@yntsti．