微生物复习知识点.doc

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1、第一章微生物的特点:1.小（个体微小）mm级：普通细菌（光镜，电镜）nm级：病毒（电镜）少数较大，肉眼可见2.简（结构简单）单细胞简单多细胞非细胞3.低（进化地位低）(1)非细胞：病毒，类病毒，朊病毒(2)原核类：普通细菌，放线菌，蓝细菌，支原体，立克次氏体，衣原体(3)真核类：真菌（酵母菌，霉菌，蕈菌）单细胞藻类，原生动物4.比表面积大5.分布广，种类多6.代谢类型多样7.生长和繁殖快8.易变异微生物在生物界中的地位:1969年Whittaker五界系统：原核生物界、原生生物界、菌物界、植物界和动物界1

2、977年-1990年Woese细胞生命三域学说：细菌域古菌域真核生物域微生物学的研究内容:微生物的形态结构、生理生化、遗传变异、进化、分类、生态、应用微生物学的分支学科:基础微生物学应用微生物学一.我国古代对微生物的利用饮食：8000年前，制曲酿酒工艺2500年前，制酱、酿醋农业：春秋战国，有机肥制作医药：种痘防天花；中药二.微生物的发现:1676年，荷兰Leeuwenhoek自制显微镜，微生物世界三.微生物学的奠基时期1.Pasteur(1822-1895)法国微生物学家、化学家近代微生物学的奠基人法兰

3、西学院院士“进入科学王国的最完美无缺的人”主要贡献:（1）否定“自生说”，证实发酵由微生物引起（2）传染病——是微菌在生物体内发展的结果免疫学——预防接种（3）建立“巴氏消毒法”Pasteur的曲颈瓶试验2.Koch1）确定了炭疽病、结核病等传染病的病原菌2）提出了柯赫氏法则3）建立和改进了微生物学的研究技术和方法Koch的助手Petri设计玻璃培养皿Koch的助手Hesse用洋菜作固体培养基的支撑物五.现代微生物学微生物学、生物化学、遗传学、分子生物学、计算机科学的综合®现代微生物学重大理论问题的突破：

4、1.1941年，Beadle和Tatum研究粗糙脉孢霉的营养缺陷株，提出了“一基因一酶”假说。2.1944年Avery在研究细菌的转化因子时发现了DNA的作用，揭露了遗传基因的化学本质。3.1953年，Watson和Crick发现了DNA的双螺旋结构，大大促进分子遗传学的发展。4.1961年Jacob和Monod提出了大肠杆菌乳糖代谢调控的操纵子学说→微生物代谢调控方式。5.1965年，Nirenberg破译DNA碱基组成的三联密码，揭示了生物同一性的本质。6.1973年，Cohen等，不同的质粒DNA体

5、外重组，转化大肠杆菌成功（基因工程）7.人干扰素、人白介素2、人集落刺激因子、重组人乙型肝炎疫苗、基因工程幼畜腹泻疫苗等多种基因工程药物和疫苗进入生产或临床试用阶段。8.DNA序列分析，DNA分子杂交，Pr生物合成，PCR技术迅速发展9.“生命三域学说”的提出10.微生物基因组的研究1995年，美国，流感嗜血杆菌（Haemophilusinfluenzae）的全基因组序列。。。。第二章微生物的纯培养和显微技术培养物：在人为规定的条件下培养、繁殖得到的微生物群体。纯培养物：只有一种微生物的培养物。B：显微技

6、术：　包括显微标本的制作、观察、测定、记录及分析等方面的内容。无菌技术：在分离、转接及培养纯培养(物)时防止其被其他微生物污染同时也不污染周围环境的技术。常用的无菌技术：高压蒸气灭菌、高温干热灭菌、超净工作台、棉塞二、用固体培养基分离纯培养菌落：单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度形成的肉眼可见、有一定形态结构的子细胞生长群体。菌苔：当固体培养基表面众多菌落连成一片时，便成为菌苔。菌落或菌苔是对微生物进行分类和鉴定的重要依据。用固体培养基分离纯培养技术：稀释倒平板法、涂布平板法、平板

7、划线分离法、稀释摇管法（用于分离严格厌氧菌。）用液体培养基分离纯培养：稀释法：经高度稀释后，同一个稀释度的试管中大多数（95%以上）表现不生长，很可能得到的是纯培养。单细胞（单孢子）分离：单细胞分离：采取显微分离法从混杂群体中直接分离单个细胞或单个个体进行培养以获得纯培养。选择培养、富集培养：富集条件：物理、化学和生物等。菌种保藏：就是根据菌种特性及保藏目的的不同，给微生物菌株以特定的条件，使其存活而得以延续。菌种保藏方法：连续转接、改变条件（干燥、低温、缺氧、缺乏营养等）在需要时再通过提供适宜的生长条件

8、使保藏物恢复活力。1、传代培养保藏是微生物保存的基本方法。琼脂斜面、半固体琼脂柱和液体培养等。橡皮塞封口或用石蜡覆盖。放置低温保存。2、冷冻保藏代谢作用停止。会有损伤：低温会使细胞内水分形成冰晶，从而引起细胞（尤其是细胞膜）的损伤。速冻及快速解冻可减少损伤；还可加一些保护剂，如0.5%左右的甘油或二甲亚砜可透入细胞，并通过降低强烈的脱水作用而保护细胞。3、干燥保藏法沙土管保存和冷冻真空干燥保藏是最常用的二种微生物干燥保藏技术。