生物酶合成氨苄西林.ppt

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1、固定化青霉素酰化酶合成氨苄西林的研究主要内容文献综述1实验方法23环氧基SBA-15固定化PGA合成氨苄西林亲水性溶剂中PGA/G-SBA-15合成氨苄西林环氧基磁性聚合物微球固定化PGA合成氨苄西林6PGA/G-SBA-15在双水相体系中合成氨苄西林全文总结745β－内酰胺抗生素酶法工艺化学法工艺青霉素酰化酶(penicillinGacylase,PGA)固定化方法固定化载体介孔分子筛聚合物微球共价结合法高效、高稳定性固定化PGA合成策略热力学合成动力学合成以环氧基载体共价固定化青霉素酰化酶合成β－内酰胺抗生素－氨苄西林根据热力学合成和动

2、力学合成的反应特点，本实验分别采用了乙二醇－缓冲体系、有机溶剂低水量体系和双水相体系合成氨苄西林。采用环氧基分子筛G-SBA-15和环氧基磁性聚合物微球GMH为载体以共价固定化青霉素酰化酶，以6-氨基青霉烷酸(6-APA)和苯甘氨酸甲酯(PGME)为底物合成氨苄西林。1.红外光谱(FT-IR)2.热重－差热(TG-DTA)3.X-射线粉末衍射(XRD)4.低温N2吸附/脱附5.扫描电子显微镜(SEM)6.透射电子显微镜(TEM)7.振动样品磁强计（VSM）8.铁含量测定2.3材料表征方法2.1实验试剂2.2实验仪器2.4.2环氧基固定化酶反

3、应原理图2-5青霉素酰化酶与环氧基载体的固定化反应2.4.3固定化酶活性的测定固定化青霉素酰化酶的酶活单位定义为：在测定条件下，每分钟催化青霉素水解生成1μmol的6-APA所需的酶量定义为一个单位(IU)。2.4固定化酶的性能测定方法图2-6硫代硫酸钠和环氧基团反应式2.5环氧基团含量测定底物和产物的检测均由高效液相色谱检测。液相色谱仪FL2200；色谱柱：VenusilXBPC184.6mm×200mm；紫外检测器：FL2200；检测波长：254nm；柱温：室温；流动相：乙酸钠缓冲溶液（50mMpH5.0）:乙睛＝88:12；进样量：1

4、0μL；流速：1mL·min-1。2.6高效液相色谱分析以及相关计算氨苄西林的合成包括三个主副反应（1）氨苄西林的合成反应（2）PGME的水解反应(PG:苯甘氨酸)（3）氨苄西林的水解反应表2-46-APA、PGME和氨苄西林的标准曲线方程StandardreagentsStandardcurveequationRelativitycoefficient6-APAY=-2533+174682XR=0.99988AmpicillinY=-10438.6+363908.66667XR=0.99919PGMEY=-26386.4+108192.6

5、7206XR=0.997812.7标准溶液的配置和检测6-APA转化率（6-APAConversion）氨苄西林产率（AmpicillinYield）反应合成水解比（S/H：Morlarratioofsynthesistohydrolysis）PGME自身水解率（HR：HydrolysisRateofPGME，PG：苯甘氨酸）分子筛水热合成SBA-15嫁接G-SBA-15PGA/G-SBA-15乙二醇（40％，V/V)-缓冲体系氨苄西林3-环氧基丙基三乙氧基硅烷（GPTS）共价结合G-SBA-15的合成以及氨苄西林合成示意图图3-1G-SB

6、A-15的FT-IR谱图3.1G-SBA-15的结构组成及表征分析3.1.1G-SBA-15的FT-IR分析图3-3G-SBA-15的XRD图谱3.1.3G-SBA-15和SBA-15的XRD分析图3-4G-SBA-15和SBA-15的N2吸附/脱附3.1.4G-SBA-15和SBA-15的N2吸附/脱附分析图3-5G-SBA-15和SBA-15的孔径分布Samplesd100spacing(nm)SBET(m2/g)DPore(nm)VPore(cm3/g)We(mmol/g)SBA-159.36445.60.9550G-SBA-159.

7、34104.80.5910.78表3-1G-SBA-15和SBA-15的结构性质3.2固定化酶PGA/G-SBA-15和PGA/SBA-15的性质SupportsEn(mg/g)AIME(IU/g)AE(IU/mg)SBA-1560.735258.64G-SBA-1570.33188326.77表3-2固定化酶PGA/G-SBA-15和PGA/SBA-15的性质3.3.1G-SBA-15环氧基团含量对氨苄西林产率的影响SamplesWe(mmol/g)Ampicillinyield(%)S/HHR(%)1.25G-SBA-150.3841.

8、90.8322.52.25G-SBA-150.5242.60.8523.62.5G-SBA-150.7850.10.9825.13.0G-SBA-150.7850.21.0325