微生物-培养方法.ppt

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1、选修一专题2微生物的培养与应用微生物的种类非细胞：病毒；原核细胞：细菌、蓝藻、放线菌、支原体等。真核细胞：真菌、原生生物、藻类等。细菌：大肠杆菌、乳酸菌等真菌：酵母菌、霉菌；原生生物：草履虫、变形虫等。微生物的特点体积小，面积大吸收多，转化快生长旺，繁殖快；适应强，易变异;分布广，种类多。微生物的营养培养基：碳源、氮源、水、无机盐等。适宜的环境条件：温度、pH、氧气等。自养型：无机碳源；异养型：有机碳源。细菌(1)结构：单细胞的原核生物，有球形，杆形，螺旋形。基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、拟核。特殊结构：

2、荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞。(3)繁殖:二分裂。菌落菌落：单个细菌用肉眼是看不见的，当单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，便会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群落。菌落是菌种鉴定的重要依据。不同种类的细菌菌落的大小，形状光泽度颜色硬度透明度都不同。培养基的种类及应用按物理状态不同划分固体培养基液体培养基半固体培养基按化学组成不同划分：合成培养基/天然培养基按用途不同划分鉴别培养基选择培养基无菌技术消毒：不能杀死芽孢和孢子。煮沸、紫外线、化学药剂灭菌：能杀死芽孢和孢子。高压蒸汽灭菌、灼烧、干热、过滤

3、。配制培养基包器材灭菌菌种扩增倒平板接种培养观察记录实验操作——微生物的培养配制培养基LB培养基:蛋白胨：10g酵母粉：5gNaCl：10g琼脂：20g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1000ml，分装后及时灭菌。包器材灭菌高压蒸汽灭菌：通过加热使菌体内蛋白质凝固变性，从而达到杀菌目的。条件：压力100kPa温度121℃时间15-30min菌种扩增摇床震荡培养12h（于LB液体培养基中）本图来自十一学校实验用具LB固体培养基大肠杆菌菌液（LB液体培养基）培养皿接种环酒精棉酒精灯镊子、火柴、记号笔接种前准备用肥

4、皂洗手并使用酒精消毒。顺序：点燃酒精灯→酒精棉擦拭双手→酒精棉擦拭桌面倒平板接种、划线灼烧接种环→取菌液→划线分离→烧至暗红接种、划线灼烧接种环→取菌液→划线分离→菌液膜接种、划线灼烧接种环→取菌液→划线分离→接种、划线①③②划线分离为什么通过划线分离可得到单菌落？倒置后做好标记，写在培养皿侧面划线分离我们的实验结果培养为什么要倒置培养？恒温37℃培养配制菌悬液1个99ml无菌水2个9ml无菌水得10-2,10-3,10-4的菌悬液1g土壤稀释菌悬液（10-4）高浓度→低浓度，换枪头接种取200ul菌悬液(1

5、0-4)涂布分离低浓度→高浓度，可不用换枪头涂布分离涂布前后三角刮刀需要灼烧吗？37℃倒置培养按浓度捆成一摞恒温37℃培养10-4、10-3,、10-2常见接种方法平板划线法：主要用于分离、纯化培养稀释涂布平扳法：主要用于分离菌种并计数常用方法微生物培养和组培中的应用消毒煮沸玻璃仪器紫外线实验室、操作台、衣物等酒精溶液手、外植体等次氯酸钠溶液等外植体灭菌高压蒸汽培养基、玻璃仪器、棉塞、牛皮纸等灼烧接种环、涂布器干热玻璃仪器