高中生物 专题二 微生物的实验室培养导学案新人教版选修1.doc

《高中生物 专题二 微生物的实验室培养导学案新人教版选修1.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、专题二微生物的培养与应用课题：微生物的实验室培养【本节目标解读】【课程目标】了解培养基的基础知识，进行微生物培养和无菌技术的操作。【课题重点】无菌技术的操作【课题难点】无菌技术的操作【基础知识】一、培养基1．概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质叫培养基。可分为培养基和培养基。2．分类方式：分类标准类型备注培养基的培养基、培养基和半固体培养基培养基中加入凝固剂（有琼脂、明胶、硅胶等）即为培养基。培养基实验室中最常用的培养基之一微生物的种类细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基和霉菌培养培养基的特殊用途基础培养基、加富培养基、选择培养基和鉴别培养基选择培养基：允

2、许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。鉴别培养基：是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后会发生某种变化，从而区别不同类型的微生物。如鉴别大肠杆菌的伊红美蓝培养基，鉴别纤维素分解菌的刚果红培养基。3．营养构成：各种培养基一般都含有、、和，此外还要满足微生物生长对、以及的要求。4．培养乳酸杆菌时需在培养基中添加、培养霉菌时需将培养基PH调至、培养细菌时需将PH调至、培养厌氧微生物则需提供条件。5．E.coli指。〖思考1〗从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？【补充】碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质

3、和分泌物，并提供能量。氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。二、无菌技术：1．关键防止的入侵。围绕如何避免杂菌的污染展开。2．无菌技术（1）对实验操作的、操作者的和进行。（2）将用于微生物培养的、和等器具进行。（3）为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行。（4）实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。〖思考2〗无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是什么？3．比较消毒和灭菌消毒灭菌概念用较的物理或化学方法杀死物体的部分微生物（不包括芽

4、孢和孢子）用较的理化因素杀死物体微生物（包括芽孢和孢子）常用方法消毒法（消毒法）、消毒法、紫外线消毒法灼烧灭菌、灭菌、灭菌适用对象操作空间、液体、双手等接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等〖思考3〗利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是什么？〖思考4〗物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的是；随后关闭排气阀继续加热，气压升至，温度为，并维持min；最后切断热源，使温度自然降温，气压务必降至时打开锅盖，其目的是防止。三、实验操作（大肠杆菌的纯化培养）（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1．计算：根据比例，计算100mL培养基各成分

5、用量。2．称量：牛肉膏较黏稠，可用玻棒挑取，同一同称量。称取牛肉膏和蛋白胨时动作要迅速，目的是防止牛肉膏吸收空气中水分。3．溶化：加水加热熔化牛肉膏与称量纸→取出称量纸→加入蛋白胨和氯化钠继续加热→加入→用蒸馏水定容到100mL（整个过程不断用玻棒搅拌，目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂）。4．灭菌：将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加塞包扎后用灭菌锅灭菌；所用培养皿用报纸包扎后用箱灭菌。5．倒平板：待培养基冷却至左右时在附近操作进行。其过程是：①在火焰旁右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞；②右手拿锥形瓶，使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰；③左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养基倒入培养皿，立

6、刻盖上皿盖。④待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置。〖思考5〗在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的称量操作中，动作要迅速，原因是什么？溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是什么？〖思考6〗牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供什么等营养物质？〖思考7〗锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么？〖思考8〗倒平板的目的是什么？〖思考9〗若皿盖和皿底之间粘有培养基，则该平板能否培养微生物？为什么？〖思考10〗配制斜面培养基作用是什么？，试管为什么要加塞棉塞？（二）纯化大肠杆菌1．方法：微生物接种的最常用方法是平板划线法和稀释涂布法（1）平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种

7、逐步稀释分散到培养基表面。其操作步骤是：①将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至烧红。②在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。③将菌种试管口通过火焰达到消灭试管口杂菌的目的。④将冷却的接种环伸入到菌液中取出一环菌种。⑤将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。⑥将皿盖打开一条缝隙，把接种环伸入平板内划3～5条平行线，盖上皿盖，不要划破培养基。⑦灼烧接种环，冷却后从第一区划线末端开始向第二区域内划线。重复上述过程，完成三、四、五区域内划线。注意不要将第五区的划线与第一区划线相连。⑧将平板倒置放在培养