ABTS自由基清除法SOP.doc

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1、主要目的：——为了测定样品清除ABTS自由基的能力。主要原理：——用K2S2O8与ABTS直接生成稳定的阳离子自由基ABTS+，抗氧化物质与ABTS+发生反应而使反应体系褪色。实验室签章一、试剂——K2S2O8水溶液——ABTA溶液——乙醇（分析纯）——PBS溶液二、仪器设备——96孔酶标板——UV-Vis可见多功能酶标仪——移液枪——200µL量程枪头一、实验方法◆前期准备ABTS储备液（7.4mmol/L）取ABTS96mg，加蒸馏水25mL。K2S2O8储备液（2.6mmol/L）取K2S2O8378.4mg，加蒸馏水10mL。将5ml7.4mmol/LABTS储备液与88µ

2、L2.6mmoL/LK2S2O8混匀，静置12-16小时，配制成ABTS工作液。◆ABTS自由基清除法0.4mLABTS工作液，用PBS溶液稀释，要求在常温下734nm处吸光值为0.7±0.02。0.2mLABTS+·工作液与10uL不同浓度受试物混合，常温避光静置6min，在734nm波长处测吸光度，平行3次。ABTS自由基清除能力由下式计算：清除率（%）=[A0-Ai/A0]×100%式中：A0为不加样品，加入ABTS的吸光度；Ai为加入样品和ABTS的吸光度