种子生活力快速测定.doc

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1、种子生活力快速测定一、实验原理通过本实验，掌握种子生活力快速测定的原理和方法。二、实验原理（1）活细胞染色：脱氢辅酶（NADH或NAFPH)存在于活的细胞内，当TTC渗透进入细胞内作为受体被脱氢辅酶上的氢还原，便由无色的TTC变为红色的三苯基甲（TTE)。当细胞死亡后，NADH会迅速被降解，不会发生相应的颜色反应，故TTC染色法可显示细胞是否存活。（2）死细胞染色：有生命力的细胞膜是一个半透性膜，因此对内渗透的物质有选择性；而无生命力的细胞，其细胞膜已经消失，因此有的有色物质（如品红）不能进入活的细胞内，但可以进入已经死亡的细胞，从而使细胞内出现该有色成分特有的颜色，故可以

2、据此鉴别细胞是否死亡。三、实验材料、药品和器具1、实验材料：花生、黄豆2、实验药品和器具：品红、TTC、培养皿、吸水纸、镊子、解剖针、刀片等四、试验方法1、分别取10颗红豆和黄豆的种子，沿种子的培从中切成两半，将带胚的部分放入培养皿中，加入TTC培养1h左右，观察胚染色的情况。胚被染色的为有活力种子，未被染色的为无活力的种子。2、别取10颗红豆和黄豆的种子，沿种子的培从中切成两半，将带胚的部分放入培养皿中，加入品红培养10-20min，倒掉品红溶液，冲洗数次，观察胚染色的情况。胚被染色的为无活力种子，未被染色的为有活力的种子。五、实验结果品种测定方法测定种子总数有生活力种子

3、粒数无生活力种子粒数种子生活率花生TTC3028293%品红3028293%黄豆TTC30300100%品红3029197%实验结果可以得出选用TTC染色和品红染色得出的结果存在差异，用TTC染色得出的结果高于品红染色法。结果分析：可能的原因是在清洗品红时没有清洗干净，品红粘在胚上，影响实验的观察，导致结果差异。六、注意事项1、选取种子的时候，要尽量选取未发芽的种子，避免影响测定。2、添加染色液时，要是然也尽量没过种胚，使种胚和染液充分接触。3、染色时间要尽量控制在规定时间内，染色过长过短都会影响结果测定。4、清洗品红染液时，要冲洗干净，冲洗数次，直至冲洗液无色为止，冲洗不

4、干净直接影响实验结果的测定。