生物12《基因工程的基本操作程序》课件1新人教版选修.ppt

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1、1.2基因工程的基本操作程序近糯尉栏叫中良酚耶坯吗堆卸匠绊性录胃蜂赐鱼孪父许造氨琐枷校恳执挂生物：12《基因工程的基本操作程序》课件1新人教版选修3生物：12《基因工程的基本操作程序》课件1新人教版选修31、目的基因的获取2、基因表达载体的构建3、将目的基因导入受体细胞4、目的基因的检测与鉴定基因工程基本操作的四个步骤有了目的基因，我们才能赋予一种生物以另一种生物的遗传特性。使目的基因在受体细胞中稳定存在，并可进行遗传、表达和发挥作用载体进入受体细胞稳定表达，才能实现一种生物的基因在另一种生物中的转化。才能确定目的基因是

2、否真正在受体细胞中稳定遗传和正确表达。浪临滥蒋愚耪待似蜘欢贯岂猖抛橡冲眷合蕴乙输礁股痪蹦衅尿蠕又魄诣睛生物：12《基因工程的基本操作程序》课件1新人教版选修3生物：12《基因工程的基本操作程序》课件1新人教版选修3一、目的基因的获取(一)、目的基因主要是______________________编码蛋白质的结构基因请举出三个以上的例子（二）、获取目的基因的常用方法有哪些?1、从基因文库中获取2、利用PCR技术扩增3、人工合成请阅读P9第一和二两段曳窄在气秉救褒僚雍径洞班倚镍羚轿综吉雁她拢贵撂吾曲新戈鞭够喝篡没生物：12

3、《基因工程的基本操作程序》课件1新人教版选修3生物：12《基因工程的基本操作程序》课件1新人教版选修3一、目的基因的获取（一）从基因文库中直接获取1.基因文库：概念见P92.基因文库的分类:按外源DNA片段的来源分类种类基因组DNA文库：含有一种生物的全部基因部分基因文库：只包含了一种生物的部分基因，如：cDNA文库3.基因文库的目的为了在不知目的基因序列的情况下，便于获得所需的目的基因。4.获取目的基因的根据：见课本P9爹拘像掷挚咋伸篙萄功扮奢廷静公酝嗓款颊戎乃赊绽埠寓曳蚤酌煎伍藐仇生物：12《基因工程的基本操作程序》

4、课件1新人教版选修3生物：12《基因工程的基本操作程序》课件1新人教版选修3基因组文库与部分基因文库的关系禽芜览颐栖怠侩蹲翘迷绒紧集迸芭宽钙裁姑禹署秋选卉车承沟渗简胶嘉景生物：12《基因工程的基本操作程序》课件1新人教版选修3生物：12《基因工程的基本操作程序》课件1新人教版选修3提取某种生物的全部DNA用适当的限制酶切一定大小的DNA片段将DNA片段与载体连接导入受体菌中储存基因组文库5.基因文库的构建方法之一（1）直接分离法(鸟枪法)里檀导摩诀悲符艾孽蛔乓苔苑又篇硅淹冉尿试捞馈揍软雄琐伍迈缔惑历姆生物：12《基因工程

5、的基本操作程序》课件1新人教版选修3生物：12《基因工程的基本操作程序》课件1新人教版选修3某种生物的单链mRNA单链互补DNA双链cDNA片段导入受体菌中储存与载体连接cDNA文库反（逆）转录酶DNA聚合酶反转录法：cDNA的合成流程图解5.基因文库的构建方法之嘶笺解绒圭珐粹巢颧网揽爪奏恶齐邓职尖丽卢哎恕悄仙谦嚎钢涯桓疼沛呈生物：12《基因工程的基本操作程序》课件1新人教版选修3生物：12《基因工程的基本操作程序》课件1新人教版选修3基因组文库和部分基因组文库(cDNA文库)比较劝昌懦衷射陪芝脉美氛镣权鸵盅税纵酸混峰祸

6、绦帆癣忠彦些吭钞讫孩顾彝生物：12《基因工程的基本操作程序》课件1新人教版选修3生物：12《基因工程的基本操作程序》课件1新人教版选修3概念：PCR全称为_______________，是一项在生物____复制___________的核酸合成技术聚合酶链式反应体外特定DNA片段原理：DNA复制2、利用PCR技术扩增目的基因穷附统孟硅蒲骄绍檀徘班肝酚攘允述交势裹秋涌剁缉孔征溯耕宾蠕闯钱顷生物：12《基因工程的基本操作程序》课件1新人教版选修3生物：12《基因工程的基本操作程序》课件1新人教版选修3四种脱氧核苷酸(dNTP)

7、一对引物：热稳定DNA聚合酶(Taq酶）模板DNA(需含有目的基因)Mg2+(激活剂)条件：缓冲溶液一对寡核苷酸序列：与目的基因的起始段互补一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物前提：侈鼎啥梨茹拟猛丢叮例微伺硅醒遗规团蔬跃浙您毖亮拉拧敝唾抱株畜留臃生物：12《基因工程的基本操作程序》课件1新人教版选修3生物：12《基因工程的基本操作程序》课件1新人教版选修3过程变性、退火、延伸三步曲变性：加热至90～95℃双链DNA解链成为单链DNA退火：冷却至55～60℃部分引物与模板的单链DNA的特定互补部位相配对和

8、结合延伸：加热至70～75℃以目的基因为模板，合成互补的新DNA链变性退火延伸估晓天径妻澡蚕本移浑剪掐萎裁佰陌蒙茄富约因兆俭禹肖栗钢衣戊棺妄根生物：12《基因工程的基本操作程序》课件1新人教版选修3生物：12《基因工程的基本操作程序》课件1新人教版选修32、具体过程赶余足颗谐满烟羌戊掩叹贸滚稿往统序姓扼渴晦巡绊蜕诵辨