接种与培养课件.ppt

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1、第五章接种与培养第一节母种转管及培养第二节再生母种扩繁成原种第四节菌种质量鉴定菌种保存第三节栽培种接种与培养教学目的：熟练掌握各级培养基接种的方法，并掌握菌种质量鉴定与保藏的方法。教学重点：培养基接种。第一节母种转管及培养一、母种转管无菌操作技术要点：1.将接种用品及原始母种放入接种箱内。2.用菇保1号、气雾消毒盒（2g/m3）或甲醛进行熏蒸，时间要在30分钟以上。3.手、台面、接种工具、母种管用酒精棉球擦试消毒。4.点燃酒精灯，火焰灼烧接种镐至烧红后冷却，凡能伸进试管的杆部均过火灭菌。5．左手大拇指和其他四指并拢握住菌种管和待接试管

2、，斜面向上，并保持水平。6．右手小指、无名指及手掌拔掉棉塞，用火焰灼烧试管口并不断搅动。7．先弃去前端1cm处，然后用接种镐快速移取黄豆粒大小的菌种入待接试管斜面培养基中央。8．灼烧试管口，并将棉塞在火焰上迅速过一下然后塞上。9．用接种镐挑持住母种管，另一只手换待接管，重复上述操作。10．收拾台面。11.贴标签二、母种培养接种后，于22℃左右的环境避光培养，每天都有要仔细观察，对污染的试管及时挑除。原始母种的培养初期一定要天天检查，以免菌丝将污染处盖住，难以挑出，造成巨大损失。一般7-10d左右可以长满管。长满管后，一部分用于扩繁，另

3、一部分用于保存。于+5℃的水箱冷藏层中至少可以保存2个月。作业1.简述接菌前须作的准备工作。（包括药品、接种工具、如何消毒等工作）2.详述母种培养基的制作过程。3.详述母种转管的动作要领。第二节再生母种扩繁成原种一、原种接种技术操作要点少量原种接种：可利用接种箱。(1)手、母种管、接种工具酒精消毒，点燃酒精灯(2)左手持母种管、右手持接种镐并灼烧(竖直、横拉)(3)拔掉棉塞并用手夹住，灼烧管口，并以火焰封住管口(4)将接种镐伸进母种管内，待冷凉，弃除前端1cm处的培养基，接种镐一经灭菌后不许接触未经灭菌的物体。(5)将母种菌种切成5段

4、，迅速移进原种瓶口，菌种不能掉外面（同时另一人将瓶口打开，并以火焰封口）。(6)要以原种瓶口迎母种管口，不能反向。封瓶口示接种块位置大量原种制作：常利用塑料接种帐或接种室，按照无菌操作规程，三人配合。一人挖取菌种，一人掀瓶口，一人摆瓶。二、培养准确贴好标签，接种后于22℃左右的培养室暗光培养。培养的最初10d，每天都要检查，及时挑选污染菌种瓶，妥善处理。及时挑选了污染菌种瓶，检查生长情况并进行详细记录。培养室不能过于干燥，湿度要保持在60%左右，否则菌种瓶失水过快。第三节栽培种接种与培养栽培种制作的接种方法，与原种相似。一般罐头瓶栽培

5、种制作也是三人配合，用接种匙挖取菌种。配合熟练，可在短时间内大量接种，效果也很好。如果栽培种制作采用塑料袋做容器，则接种时采取四人配合的形式。一人负责挖取菌种，一人负责把持袋口，另外两个人负责打开袋口和封口。封口时可利用皮套或钉书钉封口。培养方法基本同原种原始培养方法。第四节菌种质量鉴定菌种保存一、菌种质量鉴定菌种质量的优劣，不单纯是盈利问题，而且是能否在激烈的菌种销售竞争中求得生存的问题，是关系到广大栽培者的生产利益的大问题。作为菌种生产者要有高度的责任心，也要有职业道德，严格把住菌种质量关执行跟踪服务，从菇农那里获得信息反馈，使菌

6、种质量精益求精。作为菌种购买者也应懂得菌种质量鉴定的一般方法，确保生产成功1.外观鉴定很多栽培者都直接购买栽培种或购买原种用于扩接栽培种或用生产栽培。具体的选购方法归纳起看即“提、闻、看”三个字。提：即用手抓住棉花塞轻轻提起，看棉花塞松紧适度。过松或过紧均达不到过滤空气的目的，从而无法保证制作优质菌种。同时也可手测重量判断失水情况和菌龄。闻：在一批菌种中随机抽样检查。把棉花塞拔起后，半瓶口、袋口或管口靠近鼻子嗅菌种气味。若菌种中散发出酸、霉、臭等气味，则说明菌种有杂菌的污染，不是纯培养的菌丝,纯培养的菌种具有特殊香味。看：首先是看菌种

7、外观，看是否破管、破瓶、破袋。再看菌种是否“纯、正、壮、润”。2.液体鉴定在同PDA培养基同样料的液体培养基中接种待鉴定菌种，如培养后出现浑浊或稀薄现象，说明该菌种不可用于栽培，如结果为洁白的菌丝球，该菌种可以放心用于生产。3.出菇试验大规模生产前，进行出菇试验，是保证生产成功的重要方面。只有出菇试验，才能够最终直观地体现菌种质量情况。大规模生产基地，应该有示范场。二、菌种的保藏菌种是主要生产资料，必须很好保藏。做到不死亡、不衰退、不被杂菌污染，能长期在生产上应用。菌种一般都以试管种形式保藏。保藏的基本原理是使菌丝的生理代谢活动尽量降

8、低，通常采用的手段是低温、干燥和减少氧气供应。1.斜面低温保藏首先将要保存的菌种移接到适宜的斜面培养基上。一般不宜用营养贫乏的合成培养基，而要用营养丰富的半合成培养基，琼脂用量加到2.5%。并增加每管培养基的装量，不少于