生物样品的常用分析方法课件.ppt

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1、体内药分专题之五——生物样品常见分析方法思考1.在体内药物分析中所采用的生物样品有哪些?2.最常用的生物样品是什么?3.药物分析中常见分析方法包括哪些?哪些适用于体内药物分析?www。themegallery。com生物样品的常用分析方法体内药物分析是借助于现代化的仪器与技术来分析药物在体内数量与质量的变化，以获得药物在体内的各种药代动力学参数、代谢方式、代谢途径等信息。目前，用于生物样品分析的方法有很多，归纳起来主要有以下几类：www。themegallery。com生物样品的常用分析方法1.色谱分析法2.光谱分析

2、法3.免疫分析法4.微生物分析法5.电化学分析法com色谱法(chromatography)色谱法(chromatography)一种物理或化学的分离分析方法，其分离原理主要是利用物质在流动相和固定相中的分配系数，或吸附能力的差异而达到分离。包括薄层色谱(TLC)，纸色谱(PC)，凝胶色谱，气相色谱(GC)和液相色谱(LC)。www。themegallery。com薄层色谱法（thinlayerchromatography）是以涂布于支持板上的支持物作为固定相，以合适的溶剂为流动相，对混合样品进行分离、鉴定和定量的一

3、种层析分离技术。根据不同的分离机制，薄层色谱法可分为吸附薄层色谱、分配薄层色谱、离子交换薄层色谱和凝胶薄层色谱法等。www。themegallery。com薄层色谱法（thinlayerchromatography）分离速度快优点检出灵敏度高选择性好显色方便等缺点：对生物高分子分离效果不甚理想。www。themegallery。com薄层扫描法(TLCS)系指用一定波长的光照射在薄层板上，对薄层色谱中有紫外或可见吸收的斑点或经照射能激发产生荧光的斑点进行扫描，将扫描得到的图谱及积分值用于药品的质量检查的方法。与高效液

4、相色谱法相比，具有多通道效应，可同时平行分离分析多个样品；流动相用量少且选择范围宽、更换方便；固定相为一次性使用，对样品的预处理要求不高等优点。已成为薄层色谱常用的定量方法，在体内药物分析中广泛应用。www。themegallery。com薄层扫描法(TLCS)采用TLCS法检测患者血清中对乙酰氨基酚的浓度，为临床急诊中毒分析和血药浓度监测提供了快速简便的方法。该法板间测定误差小、回收率高、线性范围宽，能准确测定患者血药浓度。与文献报道的HPLC和GC法相比，具有简便快速、样品用量少、费用低和不需要进行衍生化等优点。实

5、例：薄层扫描色谱法检测血清中对乙酰氨基酚www。themegallery。com气相色谱法(gaschromatography，GC)定义：以气体为流动相的的色谱法称为气相色谱法。分类：按固定相的聚集状态：GSC、GLC按分离原理：GSC属于吸附色谱、GLC属于分配色谱按色谱操作形式：填充柱气相色谱、毛细管柱气相色谱。www。themegallery。com优点：1.效能高neff可达103-106。2.灵敏度高检测限可达纳克级或更低。3.选择性高固定相对性质极为相似的组分，如烃类异构体等有较强的分离能力。4.分析速

6、度快一般的气相色谱分析一次仅需几分钟。5.应用范围广气相色谱法广泛应用于气体和易挥发性物质或可转化为易挥发性物质的生物样品的定性和定量分析。气相色谱法(gaschromatography，GC)www。themegallery。com气相色谱法(gaschromatography，GC)缺点：要求被测药物及其代谢物必须具有一定的挥发性和热稳定性。解决方法：固定相发展和衍生化试剂的广泛使用，使生物样品不再受限制。www。themegallery。com气相色谱法(gaschromatography，GC)方法:样品加

7、入乙腈、涡旋混合、超声提取、Florisil固相萃取柱净化、氮吹，DB-17石英弹性毛细管柱30m(0.32mm，0.25μm)分离，气相色谱电子捕获检测器(GC-ECD)检测,保留时间定性，外标法定量。结果:方法最低检出限为0.01ng/ml，样品加标回收率为80.1%~94.5%，相对标准偏差(RSD)为2.3%~4.8%。实例:气相色谱法测定中毒病人血液中的溴氰菊酯气相色谱法(gaschromatography，GC)结论:该方法简便、快速、准确，检出限低，适合中毒病人血液中溴氰菊酯含量的测定。www。them

8、egallery。com定义www。themegallery。com高效液相色谱法优点以经典液相色谱为基础，以微粒型填料作固定相，采用高压送液泵和各种高灵敏度检测器。分离效能高检测灵敏度高分析速度快选择性好适用范围广缺点www。themegallery。com高效液相色谱法有“柱外效应”。在从进样到检测器之间，除了柱子以外的任何死