光激化学发光的应用课件.ppt

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1、LiCASP移液工作站LiCAHT均相发光免疫分析仪LiCA-HT光激化学发光的应用工作原理基本结构操作使用维护保养LiCA在均相条件下，将待测样品与含有发光材料的发光微球（纳米级）以及含有感光材料的感光微球（纳米级）等试剂进行混合，由于在发光微球与感光微球表面连接有生物活性分子（抗体或抗原等），可以直接或间接地捕捉待测样品中的靶分子，从而形成发光微球、靶分子和感光微球的免疫夹心复合物。激发光照射后，感光微球被诱导激活，并释放高能态的活性氧分子。该高能态的活性氧分子在近距离被发光微球俘获，从而传递能量以激活发光微球中的发光化合物

2、。数微秒后，发光微球中的发光化合物将释放出高能级红光，用单光子计数器测定这些高能级光子，并通过电脑将光子数换算为靶分子浓度。而当样本不含靶分子时，无法形成免疫夹心复合物，虽然在激发光照射下活性氧离子从感光微球中释放，但无法到达发光微球，即在液相中迅速淬灭，检测时则无高能级红光产生。LiCA技术原理——夹心法感光微粒—亲和素发光微粒-Anti-HBsHBsAg生物素-Anti-HBs发射光610nm200nm激发光680nm1O2感光微粒—亲和素发光微粒标记抗体含待测抗原生物素标记抗体激发光680nm1O2发射光610nm200n

3、m感光微粒—亲和素发光微粒标记抗体不含待测抗原生物素标记抗体激发光680nm1O2LiCA技术原理——两种微粒直径：200nm包被亲和素红色激光680nm照射释放单线态氧直径：200nm用于包被抗体/抗原接受单线态氧产生610nm光感光微粒发光微粒工作原理基本结构操作使用维护保养LiCALiCASP移液工作站样品臂试剂臂试管架试剂仓枪头架微孔板废物盒紧急暂停按钮开关机按钮试剂托盘样本架试剂仓样本仓此微孔板非彼ELISA板未包被任何抗原/抗体LiCAHT均相发光免疫分析仪托盘上盖板通用液位置清洗液位置HT微孔板槽放置好微孔板1、高

4、功率激光管发出的激发光经平面反射镜反射进去微孔板微孔，激发时间为0.5—1s（时间可调）2、受激发的微孔，移动两个孔距进入CPM光敏面区开始发光，同时CPM开始读光子数，读数时间为0.3—1s（时间可调）LiCAHT单光子计数器工作原理基本结构操作使用维护保养LiCA操作使用开机开启SP加样仪、电脑主机、显示器电源电脑桌面双击“LiCATouch”图标，输入用户名1，密码1样本输入批量输入：对已占用试管架输入无效，必须从空试管架输入样本输入依次点击：批量输入→起始管架号→起始编号→结束编号→选择项目→点击确定；单击“试管架”界面

5、，在空闲处加载样本管架号，选择容器类型“0”类（同时加载校正液管架号100），点击确定；（确保本界面的样本位置与SP加样仪样本区的位置一致）切换至任务界面，选择为“等待”状态，核对样本信息无误单个项目录入12批量录入批量录入定标依次点击：1、设置校准品→设置浓度→选中定标项目→根据校准品说明书输入浓度和验证码→点击保存→点击确定；定标2、点击到“试剂”界面，选中定标项目试剂条码，右键单击“定标”，为定标项目分配试管架号；3、点击“试管架”界面，在“空闲”处加载定标架及校正液管架号，确定试管类型（科室试管类型选“0”类，厂家校准品

6、、质控品、校正液选“1”类）；乙肝两对半校准品管架号为100号。12耗材准备点击“弹出SP”按钮，从冰箱取出试剂托盘，开试剂盖，点击“试剂”界面，查看试剂信息（对未扫入试剂，采取手工输入或更换试剂位置处理）在SP加样仪上查看加入足量枪头和微孔板（若遇到有微孔板前面有已使用的孔位，先到“SP微孔板”界面，选择废弃孔位，点击“禁用选中”）在HT面板查看通用液次数是否够本次试验使用启动加样掀开HT分析仪外盖，检查清洗液量（无清洗液时，用蒸馏水代替）启动加样点击“启动加样”按钮，切换至SP微孔板界面，查看排板信息转移加样完成后，音乐响起

7、，先转移微孔板至HT（微孔板顺序，SP从里到外，HT从左到右），安放听到“嘀”一声响，点击“完成”，切换至HT面板，查看整体进度时间，由仪器自动完成温育I、加样、温育II、读数等步骤；更换通用液若需要更换通用液时，切换至HT面板，查看通用液剩余次数，手动把通用液的黑色盖子拨开，倒置插入过液/过气针内（有落空感觉），点击“更换通用液”，两分钟内待更换完毕，点击“确定”即可结果导出实验完成后，切换至任务界面，状态选择“全部”，类型选择“样本”，项目选择“全部”，历史查询选择“今天”，点击“导出LIS”，保存至LIS信息系统接收文件夹

8、内；操作流程示意图前期准备样品的准备平衡校准品/定标品开机新批号试剂校准SP工作HT工作定标输出结果定标过期是是转板工作原理基本结构操作使用维护保养LiCA日保养实验结束，进行日保养：1、点击SP“弹出SP”，取出试剂旋上试剂盖，放回冰箱，把标本归位；按右边黄色