质谱操作教学教材.docx

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1、质谱操作精品文档质谱操作流动相要求推荐使用尽量不使用有机溶剂反相：乙腈、甲醇、乙醇、异丙醇、二氯甲烷正相：吐仑、己烷、苯、环己烷、四氯化碳四氢呋喃缓冲液乙酸铵、甲酸铵磷酸盐、柠檬酸盐、碳酸盐酸乙酸、甲酸、三氟乙酸（正离子）硫酸、高氯酸、磷酸、盐酸、磺酸碱氨水季胺、三乙胺、强碱其它清洁剂、表面活性剂、离子对试剂、不挥发的盐在使用液质进行分析的过程中1.如果分析的是生物样品，那么生物样品中的基质可能会增强或者抑制其响应，从而对我们影响我们检测，这就是基质效应；2.如果我们的线性范围很宽，ULOQ很高，那么在分析完ULOQ后，可能在系统中残留一些

2、待测物，这样就会对低浓度的检测有影响，这就是Carryover；3.我们进行MRM或者SRM检测时，不同的离子通道间可能存在相互干扰的现象，这就是Cross-talk。1）基质效应　　大概用质谱的朋友都遇到过基质效应的影响吧．用基质溶液配制标准曲线或用基质溶液配制一定浓度的标准溶液对检测结果进行校正是一种方法，这种方法在一些检测标准方法中也提到．但在实际检测中，发现即使是同一种基质的不同样品，产生的基质效应也会有不同，有时甚至是相反的．所以更有效的方法还是尽量采用有效的净化方法，如SPE、液液萃取、GPC、冷冻离心等。2）Carryover

3、　在实际检测中有遇到。个人觉得对于不同情况的残留应当采取不同的方法来处理。就残留的影响程度来看，对于程度较权的收集于网络，如有侵权请联系管理员删除精品文档残留，如只是对后一针样品有影响，可以采用穿插空白分析的方法来避免。一般情况下我们在标准曲线进样后都会进一针空白。但对于较严重的空白，则就需要对系统进行一些清洗了。就残留的部位分可分为仪器部件和管路的残留及色谱柱中的残留。对于存在于仪器管路和部件（如进样器）的残留，可将流动相换为异丙醇与水的混合溶液（1：1），并在进样瓶中也装入足够多的相同溶液，连续进样20针左右，一般就可以去除。若是残留在

4、色谱柱中，则需要针对残留物的性质，选用合适的方法对色谱柱进行清洗，而且最好换用一根更适合的色谱柱。3）Cross-talk　曾经遇到过。一般情况下，即使两化合物的母离子相同，其子离子也不会完全相同，采用MRM方式，可尽量选用不同的子离子进行分析。但若母离子、子离子、保留时间均相同，则可能是需要改换色谱柱或流动相，看是否可以在液相分离上寻求一些帮助了1.定期震气，更换机械泵油、滤网，必要时仪器除尘等。2.每个项目做完，大约1000个样品后，清洗离子源、样品锥孔、预四级杆等。3.定期对质谱进行期间核查、校准等。仪器状态正常时，以上是最基本的维护

5、。还有一些注意事项：1.每次进完样后，液相和质谱部分都要冲洗干净。2.样品前处理一定要干净。3.非挥发性的盐不能用在质谱中。收集于网络，如有侵权请联系管理员删除精品文档4.如果遇到放长假，实验室没有人，最最保险的办法就是关机，以免遇到停电的情况。5.质谱所处的工作环境最好要无尘，温、湿度要严格控制。6.样品浓度不能太高，以免污染离子源和四级杆。7.做实验时，经常关注真空、柱压、碰撞气压力等，如遇情况可以及时处理。一般也就是勤冲洗，特别是测完样品后多冲，离子源多清洗，泵油定期检查、更换，滤网及时更换清洗一、做液质，加离子诱导剂得是挥发性的，生

6、物碱用甲酸或乙酸二、我认为要维护好仪器，首先流速不能过大，液质是不能承载过大流速的；其次电压不要加到极限，尤其是正负离子转换时要适当调整；最后是做完样一定要及时冲洗和吹扫管路。注意：做液质时跑一针的时间最好不要超过45分钟，否则仪器会很累。三、LC和MS的条件优化是成功的关键。四、1、由于液质的流速较小（ESI一般为0.2ml/min），所以配置样品的溶剂强度不能太大，尽量小于起始比例，否则，会出现保留时间偏移等问题。2、如果在液相上摸好的条件，注意尤其是流动相的组成要转化成合适LCMS分析的。3、磷酸盐及其他不挥发缓冲盐在离子源会沉淀并堵

7、塞毛细管等，要更换成可挥发的有机缓冲盐。4、缓冲盐会导致离子抑制，因此要控制缓冲液的强度，<10mM。收集于网络，如有侵权请联系管理员删除精品文档5、去污剂、表面活性剂会有离子抑制现象发生，表面活性剂产生的加合物和离子簇会干扰质谱数据，因此作液质联用仪时，不要使用洗涤剂清洗玻璃器皿等容器，如果一定要用，建议超声清洗多次。五、要做好质谱的维护工作，就得从小处着手。比如分析的样品必须要干净，这样既可以保护色谱柱，也可以防止污染质谱；分析了大量的生物样品后，冲洗系统时，先用高比例的水相冲洗，把源也给洗一下，然后再换用高比例的有机相，这时要把柱后管

8、路从源上拿下来，避免柱中的杂质给冲进质谱……细节很多很多，大家在日常应用中尽量注意和避免就可以了。六、注意点1.前处理：样品一定要干净，不管是为了质谱还是为了保护柱子，生物样品提