蔗糖酶的专一性实验上课讲义.ppt

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1、病原菌多基因调控机制研究蔗糖酶的专一性研究（P69）实验目的通过对酵母蔗糖酶专一性的研究，加深对酶专一性的理解了解酵母蔗糖酶催化水解何种糖苷键2、葡萄糖、果糖和半乳糖D/αL/β3、淀粉的结构与其水解产物直链淀粉：200~300个α-葡萄糖以α-1，4糖苷键相连支链淀粉：由α-1，4糖苷键和α-1，6糖苷键在直链淀粉的基础上，分支而成还原性：无水解产物：人体内，在淀粉酶的催化下生成麦芽糖；麦芽糖在麦芽糖酶的催化下，彻底水解成解成葡萄糖。1234564、棉籽糖的结构与其水解产物分子组成：α-半乳糖、α-葡萄糖和α-呋喃果糖聚合

2、而成还原性：无彻底水解产物：α-半乳糖、α-葡萄糖和α-呋喃果糖β-1，6糖苷键→→α-1，2糖苷键1234561234565、蔗糖的结构与其水解产物分子组成：α-葡萄糖和α-呋喃果糖缩合而成的二糖还原性：无彻底水解产物：α-葡萄糖和α-呋喃果糖α-1，2糖苷键1234561234566、本尼迪特（Benedict）反应本尼迪特试剂（班氏试剂）：碱性硫酸铜溶液，具有一定的氧化能力，能与还原性单糖的半缩醛羟基发生氧化还原反应，生成氧化亚铜沉淀，砖红色或黄绿色。淀粉、蔗糖和棉籽糖都不能反应，而它们的水解产物（如葡萄糖和果糖）能够

3、发生本尼迪特反应。因此，可以利用观察有无颜色沉淀，判定蔗糖酶是否对淀粉、蔗糖和棉籽糖具有水解作用。实验材料器材：50和1000μL可调移液枪、试管、水浴锅等。试剂：（略，见教材）操作步骤（1）蔗糖酶液的制备：秤取1g干酵母粉，分次加入7ml水，研磨5min，过滤后，滤液用水稀释三倍（蔗糖酶液），待用。（2）取7支大试管，标号，按下列表格操作：混匀后，40ºC温育30min，再加入2ml班氏试剂，沸水浴中作用3min，观察各管颜色变化，并作记录。注意事项：（1）充分研磨酵母（2）脱脂棉先用蒸馏水浸湿（3）沸水时间不可过长思考题

4、：（1）试管5经长时间沸水浴后，颜色可能会变成黄绿色，为什么？（2）按专一性分，蔗糖酶分类属于何种专一性？（3）蔗糖酶水解何种糖苷键？