利用卡那霉素鉴定转基因抗虫棉的探究活动.pdf

《利用卡那霉素鉴定转基因抗虫棉的探究活动.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、生物学教学2014年(第39卷)第6期利用卡那霉素鉴定转基因抗虫棉的探究活动张建华(江苏省射阳县第四中学盐城224300)摘要本文阐述了利用卡那霉索鉴定转基因抗虫棉探究活动的目的理、材料、步骤和实验结果。关键词卡那霉索抗虫棉转基因鉴定探究活动转基因抗虫棉是指棉花细胞染色体上，整合有外砂平铺于发芽盒中，厚约20mm，细砂中的含水量以手源抗虫基因的棉花品种。其细胞外源基因中，一类是握成团、松开能散即可。抗虫基因，通常为来源于苏云金芽孢杆菌的Bt基因；3．3播种方法每个小组选取某个品种健壮、饱满的另一类是选择标志基因

2、，通常是MPTII基因。在选择种子20粒，以单粒分2行播人一个发芽盒中，每行1O压力下，不含标志基因的非转化组织或细胞死亡，而含粒，将种子均匀地压入砂的表面，然后加盖20ram厚度标志基因的转化细胞由于有抗性而继续存活。所以，的松散砂，并贴上种子名称的标签。可以用一定的筛选剂从大量的不含标志基因的非转化3．4药剂配制播后7一lOd，在棉苗子叶展平时，开组织或细胞中选择出转化细胞⋯。始配制卡那霉素溶液。将1支硫酸卡那霉素(每支卡那霉素是基因工程中应用最早最广泛的一种筛2mL，0．5g)全部倒入装有20OraL蒸馏

3、水的烧杯中，用选剂。有实验验证，让发芽的苎麻种子在含有卡那霉玻璃棒慢慢搅匀待用。硫酸卡那霉素的溶液浓度为素的MS培养基上生长，一段时间后幼苗就会开始白2500ppm(药液须由实验指导教师配制)。化，幼苗生长受到严重影响_2J。而含MPTII标记基因3．5药液处理每个小组选取正常棉苗10株(每行的苎麻，它表达的产物可以使植物对卡那霉素产生抗5株，分布要均匀，剩余棉苗全部剪除)，对其中一行5性，用一定浓度的卡那霉素处理苎麻种子，可以作为鉴株棉苗的两侧子叶的正面，用蘸有硫酸卡那霉素鉴定定转基因后代中，苎麻转化体和非转

4、化体的重要参考液的棉签进行均匀涂抹；另一行棉苗留作对照，不能沾指标-2J。本次探究实验利用本地广泛种植转基因抗上药液。虫棉的有利条件，让学生有一个对转基因生物有直接然后，放在光照充足、温度为25℃及湿度不宜太认识和实践活动的机会。大的环境中继续培养。如果温度较低时，也可以直接1探究目的将发芽盒放到智能种子发芽箱中培养。掌握卡那霉素鉴定转基因抗虫棉的原理、方法、步3．6现象观察一般在涂抹药液7～lOd后，各小组骤和结果。提高学生的多种能力，激发学习生物学的开始观察幼苗子叶颜色。热情，增强环境保护意识。4结果分析2

5、实验原理凡是实验材料为棉种新农杂l2号、新农兴7号的棉花对卡那霉素较为敏感，因而抗卡那霉素的基实验小组，实验组幼苗子叶表现为正常绿色，与对照组因被确定为抗性标记基因。转基因抗虫棉携带抗卡那棉苗子叶叶色没有区别。说明这两品种细胞中基因表霉素基因，棉苗对卡那霉素处理不敏感；而非转基因棉达产生了抗硫酸卡那霉素的物质。凡是材料为湘杂棉花不携带抗卡那霉素基因，对卡那霉素处理反应敏感。5号、盐杂3号的实验组幼苗子叶表现为斑状失绿(发利用转基因抗虫棉品种与非转基因棉花品种对卡那霉黄)，而对照组幼苗子叶仍为正常绿色，表明湘杂棉

6、5素叶色反应不同的特性，可以简便而准确地进行转基号、盐杂3号两品种细胞不能产生抗卡那霉素的物质。因抗虫棉与非转基因抗虫棉的间接鉴定。5实验结论3材料步骤棉种新农杂12号、新农兴7号是转基因抗虫棉；3．1实验材料转Bt基因抗虫棉花品种新农杂12湘杂棉5号、盐杂3号是非转基因棉花。号、新农兴7号，非转基因棉花品种湘杂棉5号，盐杂36活动总结号各若干粒，医用硫酸卡那霉素l0支(每支2mL，0．本次活动实验现象明显，效果显著。学生通过利5g)，种子发芽盒10个，经过消毒处理的细砂lOkg，脱用卡那霉素鉴定转基因抗虫棉，

7、进一步理解转基因工脂棉签100支，20OraL烧杯10个，玻璃搅拌棒10根，蒸程中重组细胞的筛选原理。各小组积极收集相关资馏水lO00mL。料，讨论制定探究实验方案，经过实施得出实验结论。3．2播前准备4位学生为一组对细砂进行消毒、过本次活动让学生直接接触转基因生物，可激发学生对筛，细砂直径为0．05—0．80ram，确保无毒无菌。将细转基因生物相关课程学习和探究的热情。加之本次实·66·生物学教学2014年(第39卷)第6期初中生物学知识高效记忆法例谈陆嘉琴(江苏省海门市能仁中学226100)摘要初中生物学涉

8、及的概念、知识点很多，本文介绍帮助学生快速记忆生物学知识的五种方法。关键词生物学知识记忆方法1编顺口溜记忆法多画简笔画，不强求图的美观性，但求图的科学性。教教师根据教学内容编制顺口溜、口诀，可以帮助学师要及时展示学生所画的图片，表扬好的，纠正错的。生巧记生物学知识。例如，显微镜操作顺口溜：一取二实践证明，画图能培养学生的观察、思考、空间想象等放，三安装；四转低倍，五对光；六夹玻片，物中