PinlsiRNA对宫颈癌细胞SiHa增殖和凋亡的影响-论文.pdf

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1、理妇产科进展2013年10月第22卷第10期ProgObstetGynecol，Oct．2013，Vo1．22，No．10·论著·PinlsiRNA对宫颈癌细胞SiHa增殖和凋亡的影响钱颖，贺晓琪，蔡惠兰。，董卫红，王泽华(1．同济大学附属东方医院妇产科，上海200120；2．华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科．武汉430022；3．湖北科技学院临床医学院妇产科教研室，成宁437100)【摘要】目的：通过小干扰RNA(siRNA)栽体介导抑制肽基脯氨酰同分异构酶(Pin1)表达，探讨Pinl对宫颈癌细胞SiHa增殖与凋亡的影响。方法：构建pGPU6／

2、GFP／Neo—PinlsiRNA表达载体，脂质体介导将其转染至宫颈癌细胞SiHa中；实验设3组：实验组(SiHa／pGPU6一PinlsiRNA组)、阴性对照组(SiHa／pGPU6一con组)和空白对照组(Si．Ha)。采用RT—PCR、Westernblot法检测Pinl的表达；M1Tr法检测细胞增殖活性；原位末端标记法(TUNEL)和流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡。结果：转染SiHa／pGPU6．PinlsiRNA的SiHa细胞中，PinlmRNA和蛋白表达分别下调68．1％和54．8％，细胞增殖显著抑制。TUNEL显示典型细胞凋亡特征，SiHa

3、／pGPU6-PinlsiRNA组的凋亡指数(AI)为(29．6±14．58)％，显著高于SiHa／pGPU6一con组l(8．44±5．65)％l和空白对照组[(5．34±4．47)％】(P

4、靶点。【关键词】RNA干扰；肽基脯氨酰顺反异构酶；宫颈癌细胞；增殖；凋亡中图分类号：R711文献标志码：A文章编号：1004—7379(2013)10—0787—05ImpactofPinlinhibitionbysiRNAonproliferationandapoptosisinhumancervicalcancercelllineSiHa．Qian，Xiaoqi，Huilan，eta1．1．DepartmentofObstetricsandGynecology，EastHospital，TongfiUniversity，Shanghai200120；2

5、．DepartmentofObstetricsandGynecology，UnionHospital，TongjiMedicalCollege，HuazhongUniversityofScienceandTechnology．Wuhan430022：3．DepartmentofObstetricsandGynecology，ClinicafMedicafCol—fege．日MbeUniversityofScienceandTechnology，Xianning437100【Abstract】objective：Toinvestigatetheinhibit

6、oryeffectofPinlsmallinterferenceRNAfsiRNA)ontheexpressionofPinlgeneincervicalcanercellsSiHaandobservetheeffectsofPinlgenesilencingonproliferationandapoptosisinSiHacel1．Methods：AvectorpGPU6／GFP／Neo—PinlfortranscribingsiRNAtargetingPinlgenewasconstructedandintro-ducedintocervicalcan

7、cercellsSiHabyLipofe-ctamine2000．Threegroupsweredesigned：theexperimentalgrouptransfectedwithpGPU6／GFP／Neo—Pinl(SiHa／pGPU6一PinlsiRNA)，thenegativeeontrolgrouptransfectedwithpGPU6／GFP／Neo(SiHa／pGPU6．Con)andthenon—transfectedgroupfSiHa)．ThePinlmRNAandproteinexpressionlevelsofSiHacells

8、werede—tectedbyRT．PCRandWesternbl