植物酯酶反应活性影响条件研究.pdf

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1、食品科学现代农业科技2014年第16期植物酯酶反应活性影响条件研究曾孟祥李元高游端辉林俊伟郭勤勤(厦门理工学院环境科学与工程学院，福建厦门361024)摘要研究酶液用量、pH值、温度、乙酸一1一萘酯用量等条件对酶促反应影响以及几种金属离子对酶促反应活性的影响，并建立酶抑制方程。结果表明：酶液用量0．25mL、乙酸一1一萘酯O．6mL、pH值6．5、温度38℃为酶促反应的最佳条件。Cu2+、Mn2+、Ca2+、Fe、Co2+等离子在一定浓度范围内对酶促反应活性具有激活作用，且Cu“浓度为0．06moFL时激活作用最为明显，能提高60．3

2、7％。C0“浓度为O．04mol／L时次之，能提高51．75％。关键词最佳条件；酶促反应；金属离子：活性中圈分类号TS201．25文献标识码A文章编号1007—5739(2014)16—0280—02StudyonEfectsofDiferentCondifionsonPlantEsteraseActivityZENGMeng-xiangLIYuan-gaoY0UDuan-huiLINJun-weiGUOQin-qin(SchoolofEnvironmentalScienceandEn~neefing，XiamenUniversity

3、ofTechnology，XiamenFujian361024)AbstractThepaperresearchedontheeffectsofenzymedosage，pHvalue，temperatureofreaction，aceticacid1一naphthylacetatedosage，onenzymaticreaction，studiedtheimpactofseveralmetaiionsontheactivityofthCenzymaticreaction．establishedequationofenzymeinhi

4、bition．Theresultsshowedthat0．25mLamountofenzymedosage，0．6mLamountofaceticacid1-naphthylacetate．pHvalue6．5。temperature38℃wereoptimumconditionsoftheenzymaticreaction．Cu、MB2+xCa2+、Fe2+xC02+andotherinorganicmetalionshaveexcitationeffectsonthecatalyticactivityoftheenzymaticr

5、eactionwithinacertainrangeofconcentration，andtheeffects0．06mol／LconcentrationofCu2+wasthemost0bvious．itcouldincrease印_37％．AndO．04mol／LconcentrationofC02+wassecond．itcouldincrease51．75％．Keywordsptimumconditions；enzymaticreaction；metalions；activity随着社会的发展，人们的健康意识曰益增强，对食品安

6、1．3试验方法全越来越重视，蔬菜水果农药残留问题也备受人们的关注。1．3．11-萘酚标准曲线的绘制。用3mL不同浓度的l一萘酚目前，检测蔬菜水果中农药残留的方法有多种．例如免疫溶液加入固蓝B盐溶液与SDS溶液混合均匀，在30℃水浴学技术、纳米金技术、酶生物传感器法、气相色谱法和乙酰中反应5min，在595nm测定吸光度。以浓度为横坐标，以胆碱酯酶法等，但普遍存在操作不方便、价格昂贵和不利595nm吸光度为纵坐标，作图得到标准曲线f9】，求其斜率k。于现场操作等缺点。而植物酯酶抑制法因其价格便宜、操作1．3．2植物酯酶活力测定。移取0．

7、25mL稀释5倍的植物酯简便等被广泛使用，但采用植物酯酶抑制法也存在灵敏度酶液，加入磷酸缓冲液4．25、0．25mL乙酸一1一萘酯溶液，于不好的缺点。恒温水浴锅定时反应5min，然后加入SDS水溶液O．25mL该文在研究酶液用量、pH值、温度等条件对酶促反应影终止反应，再加入固兰B盐溶液0．6mL显色，混匀1min后，响的基础上，深入研究C、、Mn2．、Ca2+、M、Fe、C0z十、Zn“、在595nlll处测定溶液吸光度【圳。参比溶液：按照试验方法以Na等金属离子对植物酯酶反应活性的影响。二次蒸馏水代替酶溶液。1材料与方法1．4试验

8、过程1．1试验材料1．4．1酶促反应最佳条件。分别以pH值、温度、酶液用量、试验仪器主要有722型光栅分光光度计，上海分析仪乙酸一1一萘酯用量为变量进行试验，确定酶促反应的最佳条器厂生产；HHD一2水浴恒温锅，上海谷宁仪