微生物的实验室培养2015课件.ppt

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1、专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养(一)微生物的类群(1)原核生物界:例如细菌、蓝藻(2)真菌界:例如酵母菌(3)原生生物界:例如草履虫、变形虫、衣藻(4)病毒:例如艾滋病病毒、SARS病毒目前已经知道的微生物约有10万种,分布在以下各界中:一、知识回顾无细胞结构真核细胞原核细胞生物分类填空生物细胞生物非细胞生物病毒真核生物原核生物细菌动物植物真菌蓝藻微生物其他原生生物细菌大肠杆菌淋病球菌肉毒梭菌霍乱弧菌(单细胞原核生物)1.细菌的形态(球、杆、弧、旋)2.细菌的结构细菌知识梳理:细菌2.细菌的结构(6)芽孢细菌3、细菌的繁殖:细菌的主要繁殖方式

2、:——分裂生殖(二分裂)分裂中的链球菌分裂中的大肠杆菌过程包括:1、细胞增大、伸长2、DNA分子复制3、细胞中部的细胞膜和细胞壁向内生长形成隔膜,细胞质一分为二,形成二个子细胞4.菌落(★高三考查较多)(1)定义:是单个细菌在固体培养基上大量繁殖,形成肉眼可见具有一定形态结构的子细胞群体。举例:有荚膜细菌:菌落光滑。S型无荚膜细菌:菌落粗糙。R型(2)特征:表现在菌落的大小、形状、光泽度、颜色、硬度透明度等方面。(3)功能:菌落特征是鉴别菌种的重要依据知识梳理:细菌微生物的实验室培养条件:(1)为培养的微生物提供合适的营养和环境条件(2)确保其他微生物无法混入

3、思考:微生物的实验室培养需要什么条件?如何培养细胞微生物(大肠杆菌)?如何培养病毒(噬菌体)?用特定的培养基用特定的活宿主细胞标记35S的噬菌体用35S物质配制培养基用噬菌体侵染含35S的细菌32P32P32P32P用含35S培养基培养细菌1.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方。(参考课本P83附录3)2.不管哪种培养基,一般都含有水、碳源、和氮源、无机盐等营养物质。讨论1:回忆有关活细胞中元素组成的知识,想一想为什么大多数培养基都含有这四类物质?二、基础知识:(一)培养基人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。1000mL牛肉

4、膏蛋白胨固体培养基配方除此之外,还需要满足微生物生长对特殊营养物质(例如:生长因子,即细菌生长必需,而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸等)pH以及氧气等要求。2.培养基的成分:(1)碳源概念:能为微生物提供所需碳元素的营养物质,需要量最大。种类:无机碳源CO2、NaHCO3有机碳源(有机物)糖类、脂肪酸等有机物;(天然成分混合物)花生粉饼石油等,牛肉膏等。常用的碳源:糖类(尤其是葡萄糖)自养微生物异养微生物功能:①构成微生物的细胞质和一些代谢产物;②异养微生物主要能源物质思考:1.大肠杆菌,硝化细菌,蓝细菌,乳酸菌分别选用哪种碳源?糖类,二氧化碳,二

5、氧化碳,糖类2.培养基的成分:(2)氮源概念:能为微生物提供所需氮元素的营养物质种类:无机氮源:N2、NH3、铵盐、硝酸盐、尿素;有机氮源:牛肉膏、蛋白胨为硝化细菌提供N源和能源功能:合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物培养根瘤菌、大肠杆菌、硝化细菌时分别需要哪一类氮源?思考:N2,铵盐、硝酸盐或牛肉膏、蛋白胨等,NH32.培养基的成分:注意:关于能源物质自养型:①光能自养:太阳光②化能自养:无机物(氧化放能)【例】硝化细菌氨的氧化异养型:有机物(氧化分解放能)(3)水 (4)无机盐思考若乳酸菌、根瘤菌、固氮蓝藻、硝化细菌混合在一起,我们配制什么样的培养基可以将

6、三种微生物分离?光能糖类等含碳有机物N2有机物CO2铵盐、硝酸盐、有机氮糖类等含碳有机物有机物氨氨CO2N23.满足微生物生长的条件:培养基除要提供上述几种主要营养物质外,还满足微生物生长的pH、特殊营养物质和氧气等要求。①pH:真菌5.0~6.0细菌6.5~7.5放线菌7.5~8.5②特殊营养物质——概念:微生物生长不可缺少的微量有机物添加原因:微生物自身缺乏合成这些物质的酶或合成能力有限种类:各种维生素、氨基酸、碱基等功能:酶、核酸的组成成分例如:培养乳酸菌时需要添加维生素但不是所有的微生物培养时都需要外源添加。生长因子4.培养基的配制原则:(1)目的明确

7、选材料(代谢特征、用途)(2)营养协调(注意营养物质的浓度和比例)(3)pH适宜(1)按物理状态划分:5.培养基的种类:(固体、半固体培养基需添加凝固剂,如琼脂;两者的差别是添加量的多、少)①液体培养基②半固体培养基③固体培养基(用于工业生产)(用于观察微生物的运动、鉴定菌种)(用于微生物的分离、鉴定菌落、活菌计数、保藏)微生物在其表面生长可形成菌落固体培养基液体培养基5.培养基的种类:(2)按化学成分划分:①合成培养基②天然培养基用化学成分已知的化合物配制含化学成分不明的天然物质,如酵母膏,花生粉饼等前者常用于实验室中对微生物的分类、鉴别;后者常用于大规模工

8、业生产。5.培养基的种类:①选择培养基

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