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时间:2020-10-05
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1、第五章、蛋白质翻译(2)第六章、基因表达的调控第六章、基因表达的调控一、转录水平的调控机制:原核生物的转录表达操纵子调控的综合实例(λ噬菌体发育)与基因重排二、转录后水平的调控机制三、翻译水平的调控机制四、翻译后水平的调控五、真核生物基因的表达调控理论及实验课复习4课时4课时4课时4课时4课时本次课程内容第一部分:真核生物蛋白质翻译保证蛋白质翻译准确起始的机制第二部分:转录水平基因表达调控基因表达调控的基因概念与原理原核生物4种调控模型(重点)第1节第2节第3-4节真核生物的蛋白质合成一、真核生物蛋白
2、质合成的装备(与原核生物的不同点1)mRNA:(1)原核生物:多顺反子(转录单位)真核生物:单顺反子一、真核生物蛋白质合成的装备mRNA:(2)真核mRNA无SD序列,但有5’帽子结构,翻译起始复合物形成于5’帽子结构。(3)真核生物mRNA3’有ployA结构(提高翻译效率),而原核生物没有。一、真核生物蛋白质合成的装备tRNA:真核生物:起始密码子AUG所编码的氨基酸是Met,起始AA-tRNA为Met-tRNAMet。原核生物:起始密码子AUG所编码的氨基酸并不是甲硫氨酸本身,而是甲酰甲硫氨酸,
3、起始AA-tRNA为fMet-tRNAfMet核糖体tRNA的Tloop环结合位点SD序列结合位点与5’帽子结构结合二、不同点2真核生物转录和翻译不偶联;原核生物转录和翻译相偶联,一边转录,一边就进行翻译。三、不同点3翻译起始的过程不同:原核生物:核糖体小亚基先与mRNA结合,再结合tRNA;真核生物:核糖体小亚基先与tRNA结合,在结合mRNA。(一)真核生物蛋白质翻译起始(1)40S核糖体小亚基与起始因子eIF-1和eIF-3结合,使核糖体大小亚基分离;(2)形成eIF-2-Met-tRNAMet
4、-GTP三联体复合物;它们与40S小亚基(包括eIF-1和eIF-3)结合,形成43S前起始复合物。(3)在帽子结合复合物起始因子eIF-4F的帮助下,前起始复合物与mRNA的5’端结合,形成起始复合物。eIF-4F复合物包括:eIF-4E(结合到mRNA的5’帽子结构上)、eIF-4A(解旋酶活性)和eIF-4G(连接eIF-4E与eIF-3)。(4)eIF-4B与eIF-4F复合物结合,激活eIF-4A解旋酶活性,去除mRNA5’端的二级结构。(5)起始复合物向mRNA3’扫描移动,并识别起始密码
5、子AUG(5)起始因子离开起始复合物,大小亚基相结合。形成包括40S、60S和起始tRNA的成熟翻译起始复合物。翻译起始:40S与eIF1和eIF3结合,大小亚基分离;形成eIF-2-Met-tRNAMet-GTP三联体复合物;它们与40S小亚基、eIF-1和eIF-3结合,形成43S前起始复合物。在帽子结合复合物起始因子eIF-4F的帮助下,前起始复合物与mRNA的5’端结合,形成起始复合物。eIF-4B与eIF-4F复合物结合,激活eIF-4A解旋酶活性,去除mRNA5’端的二级结构。起始因子离开
6、起始复合物,大小亚基相结合,形成包括40S、60S和起始tRNA的成熟翻译起始复合物。不同点4:不同点5:四、保证蛋白质翻译准确起始的机制tRNA对氨基酸的专一性负载tRNA对密码子的准确识读核糖体对进入A位的aa-tRNA-EF-Tu-GTP复合体在成肽键前的最后校对。1.tRNA对氨基酸的专一性负载a.氨酰tRNA合成酶(AARS)有三个结合位点:氨基酸结合位点、tRNA结合位点、ATP结合位点。其中前两个位点是专一性的。b.对tRNA的选择:一种AARS只能识别装载同一种氨基酸的一组同工受体tR
7、NA。AARS可以与tRNA的Dloop环结合(非特异性)副密码子:tRNA中与AARS发生特异性分子契合的一种空间密码。是位于tRNA各种环上的特定碱基;它们可以与AARS中的特定氨基酸结合。c.对氨基酸的选择(双筛效应):AARS的氨基酸结合位点上有结合位点和水解位点两个功能域,由此形成对相似氨基酸的严格筛选,降解错误装载的氨基酸。2.反密码子对密码子的准确识读核糖体控制着tRNA和mRNA之间相互作用时的空间构象,确保只有正确的反密码子和密码子的配对。3.核糖体对进入A位的aa-tRNA-EF-
8、Tu-GTP复合体在成肽键前的最后校对。翻译调控因子(延伸因子)的作用确保只有负载正确的氨酰-tRNA才能进入核糖体的A位,形成稳定的结合。原核生物:EF-Tu(G-蛋白)真核生物:eEF-1基因表达调控机制不同水平的调控机制:转录水平转录后水平翻译水平翻译后水平转录水平基因表达调控基本概念与原理一、基因表达的概念贮存在DNA序列中的遗传信息,经过一序列步骤表型出其生物学功能的整个生物过程。包括基因转录、翻译、蛋白质加工、组装等产生具有生物学功能的蛋白质
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