基因工程高考题.doc

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1、基因工程高考题1、（07天津30.）（14分）在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗基因（kan2）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答：（1）A过程需要的酶有。（2）B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是。（3）C过程的培养基因除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入。（4）如果利用DNA分子杂交原理对再生植物进行检测，D过程应该用作为探针。（5）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。①将转基因植株与杂交，其后代中抗卡那霉素型与

2、卡那霉素敏感型的数量比为1：1。②若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为。③若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占％。1、（14分）（1）限制性内切酶和DNA连接酶（2）具有标记基因；能在宿主细胞中复制并稳定保存（3）卡那霉素（4）放射性同位素（或荧光分子）标记的抗虫基因（5）①非转基因植株②3：1③1002、（05江苏38）(9分)在植物基因工程中，用土壤农杆菌中的Ti质粒作为运载体．把目的基因重组人Ti质粒上的T-DNA片段中，再将重组的T-DNA插入植物细胞

3、的染色体DNA中。(1)科学家在进行上述基因操作时，要用同一种分别切割质粒和目的基因，质粒的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就可通过而黏合。(2)将携带抗除草剂基因的重组Ti质粒导入二倍体油菜细胞，经培养、筛选获得一株有抗除草剂特性的转基因植株。经分析，该植株含有一个携带目的基因的T-DNA片段，因此可以把它看作是杂合子。理论上，在该转基因植株自交F1代中，仍具有抗除草剂特性的植株占总数的，原因是。(3)种植上述转基因油菜，它所携带的目的基因可以通过花粉传递给近缘物种，造成“基因污染”。如果把目的基因导人叶绿体DNA中，就可以避免“基因污染

4、”，原因是。2、(9分(1)限制性内切酶碱基互补配对(2)3／4雌雄配子各有1／2含抗除草剂基因；受精时，雌雄配于随机结合(3)叶绿体遗传表现为母系遗传，目的基因不会通过花粉传递丽在下一代中显现出来3.(08海南生物)图为某种质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因，tctR为四环素抗性基因，P为启动因子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。（1）将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRI酶切，酶切产物用D

5、NA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有、、三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行。（2）用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是；若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是。（3）目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是，其合成的产物是。（4）在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是。3答案（1）目的基因—载体连接

6、物载体--载体连接物目的基因--目的基因连接物分离纯化（其他合理答案也给分）（2）载体--载体连接物目的基因--载体连接物、载体--载体连接物（3）启动子mRNA（4）EcoRI和BamHI（只答一个酶不给分）4.（10长沙一中月考）（7分）今年甲型H1N1流感在全球爆发，我校各年级也均有发生。甲型H1N1流感的传播速度非常快，为防治疫情，各国研究小组纷纷进行了甲型H1N1流感病毒的疫苗研制工作。下面为某研究小组的前期研究工作的简要操作流程图（1）实验步骤①所代表的反应过程是。（2）实验中常采用PCR扩增得到H基因,PCR过程中使用的DNA聚合酶

7、不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其主要特点是。PCR过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？。（3）步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用的酶是。（4）构建重组表达载体时，一般需要将H基因与载体结合，常用的载体除质粒外还有等，在检测受体细胞中是否已经导入目的基因时，常常要借助载体的表达。（5）若某人为甲型H1N1流感疑似患者，在确诊时可从疑似患者体内分离病毒与已知病毒进行比较。4答案：（7分）(1)逆转录(2)耐高温

8、B(3)限制性核酸内切酶和DNA连接酶(4)噬菌体(λ噬菌体的衍生物)、动植物病毒标记基因（5）核酸（基因）的碱基序列5.限制性内切酶能