soleris系统在保健食品中霉菌和酵母菌快速检测领域应用

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1、Soleris系统在保健食品中霉菌和酵母菌快速检测领域应用　　摘要：传统的微生物检测方法由于存在检测周期长、程序复杂等缺点，已远远不能满足现代检测的需求。Soleris微生物实时光电快速检测系统（以下简称Soleris系统）是基于传统的培养基理论和染色技术准确检测微生物常规指标的新技术，能够有效缩短检测时间、提高检测效率，提前预警。完美（中国）有限公司通过实验验证Soleris方法对常规微生物在既定时间内进行检测的准确性，应用Soleris系统对本公司保健食品进行微生物检验，结果证实Soleris系统用于保健食品检测的报警时间可控制在30小时以

2、内，完整的检测报告输出可控制在48小时以内，并且检测结果的准确率≥97%。关键词：Soleris快速检测系统微生物检测阳性试验准确率7食品安全是一个全球性的话题，全球食品行业每年有5000亿的产值，保障食品质量与安全需要所有相关行业的共同努力。近年来随着环境污染的加剧和生态平衡的不断破坏，可导致人类感染的致病菌的种类越来越多，微生物对人类的威胁越来越大。随着人们对食品安全的关注越来越高，与其相关的理念与技术也不断升级。传统的微生物检验方法，主要包括形态检查和生化方法，其准确性、灵敏性均较高，但涉及的实验较多、操作烦琐、需要时间较长、准备和收尾工

3、作繁重，而且要有大量人员参与[1，2]。繁琐的检测程序不仅占用了大量的检测资源，更重要的是冗长的检测周期既不利于生产者对食品的在线控制，也不利于监管部门对问题食品的快速反应，因此运用食品微生物快速检测技术，对防止食源性疾病的危害以及对企业的发展具有重要意义[3]。本实验主要应用Soleris微生物实时光电快速检测系统对完美（中国）有限公司自产保健食品中霉菌酵母菌进行检测，以判定该系统应用于保健食品的及时性和准确性。Soleris系统原理是基于传统的培养基理论和染色技术，结合了光电检测技术和计算机控制的模块化分析系统，对产品中的微生物进行检测。在

4、预制的Soleris试剂瓶中放置特异性的培养基和专用指示剂，当微生物在培养瓶中生长时，会发生代谢产物改变培养基pH值或释放CO2等生化反应，从而引起指示剂的颜色变化。Soleris系统利用光电检测仪器，每隔6分钟监测试剂瓶底部琼脂栓的颜色变化，Soleris软件将监测到的数据收集并传输到计算机中进行分析统计，然后即可得到准确的检测结果[4]。1实验部分1.1仪器与试剂7Soleris微生物实时光电快速检测系统，高压灭菌锅，生化培养箱，超净工作台，冰箱，水浴锅，天平，微量移液枪，DYM-109试剂瓶，YI-110（补充液）。检测保健食品：胶囊产品

5、健扬胶囊（英文缩写JYC）、粉剂产品肽藻营养粉（英文缩写PSN）、口服液产品活立多（英文缩写OLI）（以上均为完美（中国）有限公司所产保健食品）。1.2样液制备1.2.1菌液制备菌种来源：黑曲霉ATCC16404、白假丝酵母菌ATCC10231以及完美高纤乐产品中分离出的霉菌。混合菌液：酵母菌菌种斜面培养物和霉菌菌种斜面培养物2～8℃保存（第二代）。从斜面培养物中传代至PDA斜面上，28℃培养3天，作为工作菌株使用。首先用接种环在新鲜接种培养的酵母菌斜面上挑取两环酵母菌至90mL无菌水中，混合均匀。然后再用10mL无菌水洗脱一支新鲜接种培养的霉

6、菌斜面，用接种环轻轻来回擦拭霉菌斜面，将孢子洗脱下来。用移液管吸取5mL孢子洗脱液沿瓶壁缓慢注入上述90mL无菌水中，混合均匀，得到霉菌酵母菌的混合菌液。此菌液100记为原液C0。用移液管吸取上述混合菌液10mL至90mL无菌水中，震摇使其混合均匀，此菌液10-1记为C1。依次按此操作程序，制备10倍系列稀释菌液。每递增稀释一次，换用一支移液管。菌液记为C0，C1，C2，…C7，C8。71.2.2样品液制备称取10g样品至80mL无菌水中，共计称取7组，分别记为样①，样②，…，样⑦。然后分别向样品液中接种10mL上述已制备的菌液，即加10mLC

7、2菌液至样①中，加10mLC3菌液至样②中，…，加10mLC8菌液至样⑦中，含不同浓度霉菌酵母菌的1∶10的阳性样品液制备完成。1.3检测流程加入150μLYI-110（补充液）于DYM-109检测试剂瓶中，将配置好的样①～⑦加入到DYM-109检测试剂瓶中，拧紧盖子轻轻振摇使待检样品与试剂瓶内液体混合均匀。将试剂瓶置于Soleris快速检测系统培养，录入样品检测信息开始检测，28℃，培养48h，读取检测结果进行统计（包括假阳性率*、假阴性率*、准确性*、特异性*、灵敏度*）。同时对样①～样⑦采用国标方法（GB/T4789.15-2003）检测

8、霉菌、酵母菌。2结果与讨论2.1芦荟矿物晶Soleris快速方法验收结果（与基准方法国标方法相比），见表1、图1。GB法检测结果2.2肽藻营养粉Sol