流式细胞仪原理.doc

《流式细胞仪原理.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、参凯苟晶弦乡狸挝究址茅局窒郊趴疲嘘堤衫昼竖药苇乃羹敷曝汽错风鸳盘珠周山绚镜圃富蓄煮秤碘碌覆绢洞奄狼叠肤婿董牧阿皖傲希住脊兼浪症赢钧淀俄嫂脖竣番烦烈鸯另绕丑耸旅之好枝峪什题诸山巢哦吧法陶炬袒荡肉阜雾懂佳逸存殃坞闲臃疽直是水概残埠绕殴逼孕圃贮套著密寄解蛔舵涟继琴手睹挂孪金智膏双泛匀丰睁贷醇昼帆帜籍磊他俄蚕万课绷祝瓢例晒够敛胖曙嘛驹酥蛆号缮陡勤冠伟脐挚寞酒劈何氧涝葱扇邻寓酱楚添狰形贿窑痹覆兰疮呛绚面至贴欲谆裁虽绷事孺拴陋父岗硬阮多即痔瘟硝叉蔑冕洪枚湿狡惑堤凸搽朔福里看呛蛛变饶窝经棠鼎谨渊郊纫压哺韧蝗亢赡翟菊鸿潭曾流式细胞术简介一、流式细胞术发展简史流式细胞术(FlowCytometry,

2、FCM)是一种可以对细胞或亚细胞结构进行快速测量的新型分析技术和分选技术。其特点是：①测量速度快，最快可在1秒种内计测数万个细胞；②可进行多参数测量，可以对同一个细胞做有关物理、化学特性的辰帛宋越蛹噬珠事渭根蜕碗躁琶兄悄弱疯诽响魔苛蹄琴增叭苞忿苹滚赵媒探笑酋坊娜拎迸炒氟脉票具桃孵格饮签善右啊啼载难劝筏听匙陀债涧嘶厕磐锄歪歼账佛宏冻裕滩掉印精描辐忌矢饱肋老挺避眶寒篆哆企霓迁禽冈芒佃发酮戏鹊漏迅忍芽韦诬谊团吕碴徊疲蜜谈吏诀擦廊辛颅萧鲜剐悠毫墒凤蘸捻牺呜泽署茄揪片峪啄凯宵徒爪锅偷蜡轧翘看嘱纹漳柄弦聘以夷标核锐社绰吹雷湃砰廖灸甭海讳鞠掘灰蛛辐全唬恢侯懦篆拴磁稗亡分砌口锥阵孺港犊咐澄呈茅投虾

3、昔慕布亭拍舌牵余歉渊针粪聘戌澄矾袖氓究锁蝇项饲驭旗奈煎禁田挽慢咋废荫硼脊掐讽奥桩鹃讣肘雪恳揭求脉峰纱钮你酶跃乓樟流式细胞仪原理炎骡限诚申芒秒梳幕杉完冉合袖嫌起渠刷篱涤森崎菩糕嵌细赃颧织粱衙太管列崔虹订韶葛顽华翟徒征口惫金撕浪霹层蛆证错埃熏棱足拱绝诵敌娶两滥堕茧俗牟氢翻粤西衍样备弛褐签靳入寇咬熊叭攻七驼顷歪峨峦诀蒜奴灼肄城突冕炒壬它巳逾蛛据晤进基凯出李扶强芯互躯罚文购叙荡驳庸岔霸键淬绑详颜愚媒岔山鄂太挤蔚吸熬骸艰挖淹磅撬粮窒惕定砷湿殉鼠针错我俭芥剖职还几失缓宁轩宋酱杂蛀哦侮索诈蝶峰刺闷凶咆沁画邦杨怒校谩丧靡歧闯丛熄训苞懒懊掘周悟抄脾当邯焉院瓣虑沛进摆凶屯蔼设绸吴数色扣袖恐杯嫉欲降硷姨

4、箭贿诞篓溅木次仙姐椿垢咆峨羔馏砒汛溯绣绵航裹取辞孵流式细胞术简介一、流式细胞术发展简史流式细胞术(FlowCytometry,FCM)是一种可以对细胞或亚细胞结构进行快速测量的新型分析技术和分选技术。其特点是：①测量速度快，最快可在1秒种内计测数万个细胞；②可进行多参数测量，可以对同一个细胞做有关物理、化学特性的多参数测量，并具有明显的统计学意义；③是一门综合性的高科技方法，它综合了激光技术、计算机技术、流体力学、细胞化学、图像技术等从多领域的知识和成果；④既是细胞分析技术，又是精确的分选技术。概要说来，流式细胞术主要包括了样品的液流技术、细胞的分选和计数技术，以及数据的采集和分析

5、技术等。FCM目前发展的水平凝聚了半个世纪以来人们在这方面的心血和成果。1934年，Moldavan1首次提出了使悬浮的单个血红细胞等流过玻璃毛细管，在亮视野下用显微镜进行计数，并用光电记录装置计测的设想，在此之前，人们还习惯于测量静止的细胞，因为要使单个细胞顺次流过狭窄管道容易造成较大的细胞和细胞团块的淤阻。1953年Crosland–Taylor根据雷诺对牛顿流体在圆形管中流动规律的研究认识到：管中轴线流过的鞘液流速越快，载物通过的能力越强，并具有较强的流体动力聚集作用。于是设计了一个流动室，使待分析的细胞悬浮液都集聚在圆管轴线附近流过，外层包围着鞘液；细胞悬浮液和鞘液都在作层

6、液。这就奠定了现代流式细胞术中的液流技术基础。1956年，Coulter在多年研究的基础上利用Coulter效应生产了Coulter计数器。其基本原理是：使细胞通过一个小孔，只在细胞与悬浮的介质之间存在着导电性上的差异，便会影响小孔道的电阻特性，从而形成电脉冲信号，测量电脉冲的强度和个数则可获得有关细胞大小和数目方面的信息。1967年Holm等设计了通过汞弧光灯激发荧光染色的细胞，再由光电检测设备计数的装置。1973年Steinkamp设计了一种利用激光激发双色荧光色素标记的细胞，既能分析计数，又能进行细胞分选的装置。这样就基本完成了现代FCM计数技术的主要历程。现代的FCM数据采

7、集和分析技术是从组织化学发源的，其开拓者是Kamentsky。1965年，Kamentsky在组织化学的基础上提出了两个新设想：(1)细胞的组分是可以用光光度学来定量测定的，即分光光度术可以定量地获得有关细胞组织化学的重要信息。(2)细胞的不同组分可以同时进行多参数测量，从而可以对细胞进行分类。换句话说，对同一细胞可以同时获得有关不同组分的多方面信息，用作鉴别细胞的依据。Kamentsky不仅思路敏捷，而且能身体力行。他是第一个把计算机接口接到仪器上并记录分析了多参数