新导学案多聚酶链式反应扩增DNA片段.doc

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1、多聚酶链式反应扩增DNA片段导学案命题人：朱旭审题人：吴延鹏学习目标：尝试PCR技术的基本操作；理解PCR技术的原理；一、预习案【活动1】阅读教材P58“PCR原理”，讨论并回答下列问题：1.（记忆）PCR技术扩增DNA的过程与细胞内的过程类似。2.（记忆）DNA分子复制的人工控制解开螺旋：在80〜100C时，DNA双螺旋打开，形成两条DNA单链，称为。恢复螺旋：在50〜60°C左右时，两条DNA单链重新形成双螺旋结构，称为o复制条件：缓冲液，、、、。控制仪器：（温度周期性自动调节仪）。【思考1】缓冲液相当细胞内的什么成分？【活动2】阅读教材P59“PCR的反应过程”，讨论并回

2、答下列问题：1.（理解）PCR反应过程是：在升温至—°C以上时DNA解旋；在降温至—°C左右时引物与DNA单链结合；在升温至—°C左右时合成DNA子链。［活动3】阅读教材P62“实验操作”，讨论并回答下列问题：1.（记忆）在PCR反应体系的配方中，含有的成分有缓冲液、DNA模板、四种脱氧核昔酸、热稳定DNA聚合酶、两种RNA引物、水。2.（了解）实验操作步骤：按照PCR反应体系配方配制反应液；将PCR反应体系50uL用转移到微量离心管（0.5n】L）中；将微量离心管放到—仪中；设置PCR仪的:DNA在PCR仪中大量扩增。3.（了解）水浴法：将微型离心管依次在—°C、—°C、—°

3、C恒温水浴锅中循环处理。【活动4】阅读教材P62“操作提示”，讨论并回答下列问题：1.（记忆）避免，所用仪器、缓冲液、蒸馅水等使用前高压灭菌。2.（记忆）将分装成小份，一20°C低温保存。3.（记忆）每添加一种反应成分，更换一个o4.（记忆）混匀后离心处理，使集中在离心管底部。【活动5】阅读教材P63“结果分析与评价”，讨论并回答下列问题：1.（记忆）反应液稀释：取2OLPCR反应液，添加蒸馅水。2.（记忆）分光光度计调零：将100?L蒸馅水添加到比色杯中，在nm处将分光光度计读数调节为O3.（记忆）将100?L反应稀释液倒入比色杯中，测定在260nm处的。4.（记忆）DNA含

4、量计算：DNA含量（？g）=。二、探究案【活动1】回忆教材P58“PCR原理”，讨论并回答下列问题:【思考1】填写下表：（记忆）细胞内DNA复制条件分析条件参与的组分在DNA分子复制中的作用模板DNA的两条单链提供复制的模板原料四种脱氧核甘酸合成DNA子链的原料酶解旋酶打开DNA双螺旋RNA聚合酶合成RNA引物DNA聚合酶催化合成DNA子链；切除引物DNA连接酶将不连续的DNA子链连接起来能量ATP为解螺旋和合成子链提供能量引物RNA为DNA聚合酶提供合成的3,端起点1、（理解）细胞内DNA的复制小组合作，展示过程：（互相提问形式）【活动2】阅读教材P59“PCR的反应过程”，

5、讨论并回答下列问题:1.（记忆）填写PCR反应流程：2、小组成员展示讲解PCR反应的过程［活动3】阅读教材P62“实验操作”，讨论并回答下列问题:1、说出PCR反应体系的配方中，含有的成分：三、课堂反馈案1.DNA分子复:制时，解旋的两条链中（）A仅一条作为复制模板B两条链作为模板并复制出两个不同的DNA分子C两条链作为模板并复制出两个相同的DNA分子D两条链作为模板，各自合成一条子链，然后两条母链重新结合为原来的双螺旋分子，两条新链结合成一个全新的DNA分子2.下列关于DNA复制过程的正确顺序是（）①互补碱基对之间氢键断裂②互补碱基对之间形成氢键③DNA分子在解旋酶的作用下解

6、旋④以解旋后的母链为模板进行碱基互补配对⑤子链与母链盘旋成双螺旋状结构A①③④②⑤B①④②⑤③C①③⑤④②D③①（3）②⑤3.下列各项过程中，遵循“碱基互补配对原则”的有（）①DNA复制②RNA复制③转录④翻译⑤逆转录A①②③④⑤B①②③④C①②③⑤D①③④⑤4.实验室内模拟生物体DNA的复制必需的一组条件是（）①酶②游离的脱氧核甘酸③ATP④DNA分子⑤mRNA@tRNA⑦适宜的温度⑧适宜的酸碱度A①②③④⑤⑥B②③④⑤⑥⑦C②③④⑤⑦⑧D①②③④⑦⑧5.利用PCR技术，把一个双链DNA分子当作第一代，经过3次循环，在第四代DNA分子中，有几条第一代脱氧核苜酸的长链？（）A2

7、B4C8D16,6.关于DNA分子的叙述中，正确的是（）A.DNA的两条链是极性相同，同向平行B.DNA的两条链是极性相同，反向平行C.DNA的两条链中极性不同，反向平行的D.DNA的两条链是极性不同，同向平行7.假设PCR反应中，只有一个DNA的片段作为模板，请计算在30次循环后，反应物中大约有多少这样的DNA片段（）A215B230C260D2318.DNA的合成方向总是（）延伸。A从DNA分子的左端向右端B从DNA分子的右端向左端C从子链的5,端向3,端D从子链的3,端向5,端9.要使