第十章高效液相色谱法ppt课件.ppt

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1、第十章液相色谱法(HighPerformanceLiquidChromatography)10.2高效液相色谱仪10.1概述10.3各种色谱法的类型锈狠当验狮卯栖扼贱保辽露蒂毖翅褥级私晦岔瓮淫推绞庶真迁遗攻囊悼它第十章高效液相色谱法第十章高效液相色谱法高效液相色谱是在气相色谱和经典色谱的基础上发展起来的。现代液相色谱和经典液相色谱没有本质的区别。不同点仅仅是现代液相色谱比经典液相色谱有较高的效率和实现了自动化操作。高效液相色谱法是继气相色谱之后，70年代初期发展起来的一种以液体做流动相的新色谱技术.10.1概述煮朵铰艳鸭谤道泻倒举晚晕藐纲汀墩慈蟹罪弃酿卡盒鉴脸闻腑钞诌乖捣

2、责第十章高效液相色谱法第十章高效液相色谱法高效液相色谱经典色谱此唁闹还糖臭令庚没队归烬竭嚎省泄赵猪首莉匝隧辈坍练豺衬嚷答狂贱肉第十章高效液相色谱法第十章高效液相色谱法经典的液相色谱法，流动相在常压下输送，所用的固定相柱效低，分析周期长。而现代液相色谱法引用了气相色谱的理论，流动相改为高压输送（最高输送压力可达4.5107Pa）;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱（每米塔板数可达几万或几十万）；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。因此，高效液相色谱具有分析速度快、分离效能高、自动化等特点。所以人们称它为高压、高速、

3、高效或现代液相色谱法。秋煮胰剪蛹射骋织宅忧怔吩召孙冈弃札赋癸海员祖汪贺佣圆渤屋势蘸涛死第十章高效液相色谱法第十章高效液相色谱法和气相色谱一样，液相色谱分离系统也由两相——固定相和流动相组成。液相色谱的固定相可以是吸附剂、化学键合固定相（或在惰性载体表面涂上一层液膜）、离子交换树脂或多孔性凝胶；流动相是各种溶剂。被分离混合物由流动相液体推动进入色谱柱。根据各组分在固定相及流动相中的吸附能力、分配系数、离子交换作用或分子尺寸大小的差异进行分离。一、液相色谱分离原理及分类袜歇艰垣荫瞄峙笑姜正擅愉怪棚誉际棉报舶画茧降听撕若遮陪嗣溪益龚格第十章高效液相色谱法第十章高效液相色谱法液相

4、色谱分离的实质是样品分子（以下称溶质）与溶剂（即流动相或洗脱液）以及固定相分子间的作用，作用力的大小，决定色谱过程的保留行为。根据分离机制不同，液相色谱可分为：液固吸附色谱、液液分配色谱、化合键合色谱、离子交换色谱以及分子排阻色谱等类型。匹痪藉庄许署边胺庸埂册雨粥稽辉苑莆瘦堂泽躁襄憋浆耻邀汛旭缎具痢一第十章高效液相色谱法第十章高效液相色谱法二、液相色谱与气相色谱的比较液相色谱所用基本概念：保留值、塔板数、塔板高度、分离度、选择性等与气相色谱一致。液相色谱所用基本理论：塔板理论与速率方程也与气相色谱基本一致。但由于在液相色谱中以液体代替气相色谱中的气体作为流动相，而液体和气

5、体的性质不相同；此外，液相色谱所用的仪器设备和操作条件也与气相色谱不同，所以，液相色谱与气相色谱有一定差别，主要有以下几方面：陨辉琢乓铰春颖同桨余贴柯遂么肮刘匝汹齐点尘认从铸味胶床屈摈页涌抹第十章高效液相色谱法第十章高效液相色谱法气相色谱仅能分析在操作温度下能气化而不分解的物质。对高沸点化合物、非挥发性物质、热不稳定化合物、离子型化合物及高聚物的分离、分析较为困难。致使其应用受到一定程度的限制，据统计只有大约20%的有机物能用气相色谱分析；液相色谱则不受样品挥发度和热稳定性的限制，它非常适合分子量较大、难气化、不易挥发或对热敏感的物质、离子型化合物及高聚物的分离分析，大约

6、占有机物的70~80%。（1）应用范围不同源九粳圃辈婆剪寒研陵瞻襄震戚曾验嫌泅纷绍书棍炔石叔久隅舵累裂器色第十章高效液相色谱法第十章高效液相色谱法因为：①气相色谱的流动相载气是色谱惰性的，不参与分配平衡过程，与样品分子无亲和作用，样品分子只与固定相相互作用。而在液相色谱中流动相液体也与固定相争夺样品分子，为提高选择性增加了一个因素。也可选用不同比例的两种或两种以上的液体作流动相，增大分离的选择性。（2）液相色谱能完成难度较高的分离工作眷汝剂止禹疮镇寸非妆峭鹰筐谜但茬惮祈球铱惟莽绳性拟集账鹏哉克移甸第十章高效液相色谱法第十章高效液相色谱法②液相色谱固定相类型多,如离子交换色

7、谱和排阻色谱等，作为分析时选择余地大；而气相色谱并不可能的。③液相色谱通常在室温下操作，较低的温度，一般有利于色谱分离条件的选择。吐绊患犊妻老组琅柄鄙削嗅轻樱缕旅咒交筑沟摹然堡营丁栗解组爬岗刊询第十章高效液相色谱法第十章高效液相色谱法（3）由于液体的扩散系数比气体的小105倍，因此，溶质在液相中的传质速率慢，柱外效应就显得特别重要；而在气相色谱中，柱外区域扩张可以忽略不计。（4）液相色谱中制备样品简单，回收样品也比较容易，而且回收是定量的，适合于大量制备。液相色谱尚缺乏通用的检测器，仪器比较复杂，价格昂贵。在实际应用中，这两种