上课《菊花的组织培养》ppt课件.ppt

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1、课题1菊花的组织培养专题3植物的组织培养通过必修课的学习，我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么，有没有不用种子来培育植物的方法呢？营养繁殖扦插嫁接压条扦插嫁接压条植物组织培养是二十世纪发展起来的新技术，近三十年来由于组织培养基础理论研究的深入，发展极为迅速，发表的文献浩如烟海，几乎以植物为研究对象的各个分支学科都在广泛进行组织培养。植物组织培养具有增殖效率高、繁殖速度快的特点,可以用较短的时间和较少的空间生产出大量的试管苗。植物组织培养简介鳞托菊麦秆菊瓜叶菊植物组织培养的基本过程影响植物组织培养的因素菊花的组织培养概念：在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞

2、，在人工配制的培养基上培养，给予适宜的培养条件，诱导其脱分化产生愈伤组织、继续进行培养使其再分化形成根芽等器官，最终形成完整的植株。一、植物组织培养的基本过程离体的植物器官、组织、细胞脱分化愈伤组织再分化根芽植物体植物组织培养过程关键词：外植体、脱分化、愈伤组织、再分化外植体愈伤组织植物组织培养的原理（理论基础）——细胞全能性概念：已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能。基础：生物体的细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质。表达条件：离体条件无菌操作适宜物质的诱导和调节（植物激素）适宜的营养物质温度、酸碱度、光照等条件的控制二、影响植物组织培养的因素材料的种类、年龄及保存时间长短等营

3、养植物激素PH、温度、光照等条件（1）植物材料的选择烟草和胡萝卜的组织培养较为容易枸杞愈伤组织的芽诱导比较难对于同一种植物材料，材料的年龄、保存时间的长短也会影响实验结果菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝（2）MS培养基主要成分包括：A、大量元素:N、P、S、K、Ca、Mg等B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co等C、有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等D、植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；蔗

4、糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。MS固体培养基成分及比例常用的植物激素：生长素、细胞分裂素和赤霉素生长素、细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈加强的趋势激素的浓度、使用顺序、使用的量及比例影响植物细胞的发育方向（3）植物激素的影响生长素类：2，4－二氯苯氧乙酸（2，4－D）、吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸

5、（NAA）、吲哚丁酸（IBA）细胞分裂素类：激动素（KT）、6－苄基嘌呤（6－BA）、玉米素（ZT）赤霉素类：赤霉酸（GA3）使用顺序实验结果先使用生长素，后使用细胞分裂素有利于细胞分裂，但不利分化先使用细胞分裂素后使用生长素细胞既分裂、也分化同时使用分化频率高激素的使用顺序、使用的量及比例影响植物细胞的发育方向（4）pH、温度、光照pH控制在5.8左右温度控制在18－22℃每日用日光灯照射12h三、菊花的组织培养（一）制备MS固体培养基（二）外植体消毒（三）接种（四）培养（五）移栽（六）栽培（一）制备MS固体培养基MS培养基包括20多种营养成分，实验室一般使用4℃保存配制好的培养基母液来

6、制备1、配制各种母液①无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100倍，常温保存②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液③用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量2、配制培养基分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml①配制培养液②调PH③培养基的分装由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此不必添加植物激素3、灭菌分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝（二）外植体消毒2、消毒①流水冲洗菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右②酒精处理用无菌吸水纸吸

7、干外植体表面的水分，放入体积分数为70％的酒精中摇动2－3次，持续6－7s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗③消毒液处理取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中1－2min，取出后在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液（三）接种污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种室消毒是至关重要的。用70％的酒精喷雾使空气消毒，酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟1、接种室消毒2、无菌操作要