植物化学物分析解析讲课教案.ppt

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1、植物化学物分析解析茶多酚（TeaPolyphenols）茶多酚（TeaPolyphenols）是茶叶中多酚类物质的总称，包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等。主要为黄烷醇（儿茶素）类，儿茶素占60~80%。儿茶素类化合物主要包括儿茶素（EC）、没食子儿茶素（EGC）、儿茶素没食子酸酯（ECG）和没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）4种物质儿茶素类儿茶素（EC）没食子儿茶素（EGC）儿茶素没食子酸酯（ECG）没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）茶多酚（TeaPolyphenols），又名抗氧灵、维多酚、防哈灵，是茶叶中所含的一类多羟基类化合物，简称TP

2、。儿茶素类化合物为茶多酚的主体成分，占茶多酚总量的60%~80%。摘要高效液相色谱分析“京威”茯砖茶的四个主要发酵过程表明没食子儿茶素没食子酸脂（EGCG）和儿茶素没食子酸酯（ECG）持续下降到只占终产物的1/3左右。对终产物的植物化学物进行研究发现儿茶素类有四个新B环裂解代谢物（BRFCs），即茯砖素C-F(1-4)以及三个已知BRFCs(5-7)，六个已知儿茶素（8-13），五个简单酚类（14-18），七个黄酮和黄酮苷（19-25），两个生物碱（26,27），三个三萜类化合物（28-30），一个类固醇（31）。这些化合物的结构由一维、二维核磁共振，高分辨质

3、谱，红外光谱以及CD光谱等鉴定。茶叶中有五个化合物（16-18,28,29）是首次报道，并同时提供主要茶多酚降解及BRFCs代产生的可能途径。1研究背景随着发酵程度的增加，茶可具体分为四大类：未发酵（如绿茶）、半发酵（如乌龙茶）、完全发酵的（如红茶）、和后发酵（黑茶，如茯砖茶，FBT）。砖黑茶是以砖的形式用老的、粗的叶子及茶树、冬虫夏草等小树枝压缩而成的一种独特的后发酵茶。据报道，砖黑茶还有抗肥胖、抗菌、抗氧化、抑制脂肪沉积等特殊健康益处。根据材料和制造工艺，砖茶产品可分为以下几种类型：黑砖茶、茯砖茶（FBT）、青砖茶和普洱砖茶。据报道，在部分发酵的乌龙茶，全

4、发酵的红茶以及后期发酵的黑茶中主要茶多酚变化明显，尤其是没食子儿茶素没食子酸脂（EGCG）。绿茶中的儿茶素含量比其他种类的茶高，因为新鲜采摘茶叶中的多酚氧化酶和天然微生物在蒸熟或煎制后会立即失活。而黑茶在发酵过程中，茶叶中的主要儿茶素类被多酚氧化酶催化的成茶黄素，大大减少了儿茶素的含量。茯砖茶（FBT）在“发花”过程中，会有大量的微生物繁殖，并释放胞外酶，由于酶的氧化作用，使得茶叶中的儿茶素，特别是没食子儿茶素没食子酸脂（EGCG）及没食子儿茶素（ECG）的水平大大下降。据报道，在茯砖茶（FBT）生产过程中能够减少粗涩味和酒精味的产生，能提高其质量和口味的主要

5、反应是氧化聚合。一些B环裂解代谢物的和其他聚合产品的明显区别，也可能有助于形成FBT的独特风味和品质。1研究背景虽有关茯砖茶的化学物分析及化合物提纯已经有了大量研究，但是到目前，我们还没有意识到可用高效液相色谱法分析茯砖茶在生产过程中主要茶多酚的变化。另外，还没有形成对“京威”茯砖茶化学提纯的系统研究。因此，本文我们主要探究“京威”茯砖茶的化学组成。通过高效液相色谱，已经分离有31种化合物。通过红外光谱、核磁共振氢谱、高分辨质谱及CD光谱确定4个新B环裂变代谢物与27种已知化合物。高效液相色谱分析不同发酵程度中主要儿茶素水平变化情况，并提供了B环裂变代谢物的可

6、能代谢途径。2材料与方法2.1主要仪器ThermoNicolet8700红外光谱仪；氢谱、碳谱；Agilent6210高效液相色谱仪；J-815分光偏振计：进行圆二色性（CD）光谱检测。2.2材料与试剂没食子酸（GA）、儿茶素（EC）、儿茶素没食子酸酯（ECG）、没食子儿茶素没食子酸脂（EGCG）标准品，购于成都超纯科技有限公司，纯度高于98%；“京威”茯砖茶，购于苍山茶叶公司（中国咸阳），制作过程中的样品仍由该公司提供，真菌生长阶段（称为发花期）是制作茯砖茶的关键步骤，其间的化学成分发生很大的变化，高效液相色谱也主要分析这一期间主要儿茶素的变化。2.3高效液

7、相色谱分析参数确定分析使用XPODS-AC18色谱柱（内径250mm×4.6mm，5um，宁波H＆E有限公司）；柱温：30℃；洗脱液：流动相A（0.17%乙酸水溶液），流动相B（乙腈）；流动相B的梯度设置：0–4min,6%;4–16min,6%-14%;16–22min，4%-15%;22–32min,15%-18%;32–37min,18%-29%;37–45min,29%-45%;45–50min,45%;50–51min,45%-6%;保持浓度6%洗脱10min；溶剂流速：1.0mL/min；注射量：5uL；检测波长：280nm。2材料与方法2.4“京

8、威”茯砖茶植物化学物质的分离称取“京威