果蔬中维生素含量的测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法).docx

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1、实验设计题目果蔬中维生素含量的测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法)学院XXX专业XXXX年级XXXX组员XXXX一、实验背景及目的:维生素C又称为抗坏血酸,常存在于新鲜的蔬菜和某些水果中,尤其是在橙子、枣、辣椒、苦瓜中含量丰富。是维持机体正常生理功能的重要维生素之一。维生素C抗坏血酸在食品工业中常用做抗氧化剂,维生素C可促进胶原蛋白抗体,具有抗癌的作用;它能参与神经介质、激素的生物合成;能将胆固醇转化为胆汁酸,使高胆固醇血症患者的胆固醇下降;能将Fe抖还原为Fe,使其易于吸收,有利于血红蛋白的形成;还具有解毒的作用。橙子中防治坏血病的主要物质为维生素C,本文以橙子为检

2、测对象,对其营养成分——维生素C的含量进行测定,正确了解营养价值。目前国内测定维生素c的常见方法有:DPPH法、碘滴定法、紫外分光光度计法、高效液相色谱法、苯肼比色法等。这些方法各有特点,但操作过程复杂,较慢,仪器昂贵。Vc易被热、碱、氧和光破坏,根据实验室的条件,本次实验采用2,6一二氯靛酚滴定法进行实验研究及分析测定。参考国标法GB6195-1986直接测定橙子中维生素c的含量,其方法简便、快速、结果准确。二、实验部分1、实验原理染料2,6一二氯靛酚的颜色反应表现两种特性,一是取决于其氧化还原状态,氧化态为深蓝色,还原态变为无色,二是受其介质的酸度影响,在碱性溶液中呈深蓝色,在

3、酸性介质中呈浅红色。用蓝色的碱性染料标准溶液,对含维生素C的酸性浸出液进行氧化还原滴定,染料被还原为无色,当到达滴定终点时,多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色,由染料用量计算样品中还原型抗坏血酸的含量。2、实验设备及试剂2.1仪器设备高速组织捣碎机:8000一12000r/min。分析天平。滴定管:25mL、10mL。容量瓶:100mL。锥形瓶:100mL、50mL。吸管:10mL、5mL、2mL、1mL。烧杯:250mL、50mL。漏斗。2.2试剂及材料2.2.1柑橘、圣女果、红枣、胡萝卜。2.2.2浸提剂2.2.3偏磷酸:2%溶液(W/V)草酸:2%溶液(W/V)2.2.4白

4、陶土(或称高岭土):对维生素C无吸附性。2.2.5抗坏血酸标准溶液(1mg/mL):称取100mg(准确至0.lmg)抗坏血酸,溶于浸提剂中并稀至100mL,现配现用。3、滴定度T测定2,6一二氯靛酚(2,6一二氯靛酚吲哚酚钠盐)溶液:称取碳酸氢钠52mg溶解在200ml热蒸馏水中,然后称取2,6一二氯靛酚50mg溶解在上述碳酸氢钠溶液中。冷却定容至250mL,过滤至棕色瓶内,保存在冰箱中。每次使用前,用标准抗坏血酸标定其滴定度。即吸取1mL抗坏血酸标准溶液于50mL锥形瓶中,加入l0mL浸提剂,摇匀。同时,另取10mL浸提剂做空白试验,用2,6一二氯靛酚溶液滴定至溶液呈粉红色15

5、s不褪色为止。滴定度按下式计算:T滴定度(mg/mL)=C×V/(V1-V2)式中:T—每毫升2,6一二氯靛酚溶液相当于抗坏血酸的毫克数,C—抗坏血酸的浓度,mg/mL;V—吸取抗坏血酸的体积,mL;V1—滴定抗坏血酸溶液所用2,6一二氯靛酚溶液的体积,mL;V2—滴定空白所用2,6一二氯靛酚溶液的体积,mL3.测定步骤3.1提取用水洗干净新鲜蔬菜或整个新鲜水果(橙子),放人组织捣碎机中,加20mL浸提剂,迅速捣成匀浆。称取10一40g浆状样品,加入10ml二甲苯进行萃取,用分液漏斗分离出下层溶液,吸取下层溶液10mL,移入100ml容量瓶中。并稀释至刻度,摇匀过滤。3.2标准液滴

6、定吸取l0mL滤液放人50mL锥形瓶中,用已标定过的2,6一二氧靛酚溶液滴定,直至溶液呈粉红色15s不褪色为止。取浸提液10mL作空白对照,结果计算。3.3维生素C按以下公式计算:(V-V0)×T×A维生素C(mg/100g)=----------------------------×100%W式中:V—滴定样液时消耗染料溶液的体积,mL。V0—滴定空白时消耗染料溶液的体积,mL。T—2,6一二氯靛酚染料滴定度,mg/mL。A—稀释倍数。W—样品重量。3.4平行测定的结果,用算术平均值表示,取三位有效数字,含量低的保留小数点后两位数字。3,5平行测定结果的相对相差,在维生素C含量大

7、于20mg/l00g时,不得超过2%,小于20mg/100g时,不得超过5%。三、实验数据:组别体积(ml)第一组第二组第三组V(滴定样液时消耗染料溶液的体积)mlV0(滴定空白时消耗染料溶液的体积)mlV-V0(体积改变量)ml100g橙子中Vc含量mg四、注意事项(1)某些水果、蔬菜(如橘子、西红柿等)浆状物定容时泡沫太多,可加数滴丁醇或辛醇消泡。(2)样品的提取液制备和滴定过程,要避免阳光照射和与铜、铁器具接触,以免抗坏血酸被破坏。(3)整个操作过程要迅速,防止

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