-DNA重组技术的基本工具.ppt

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1、1.1DNA重组技术的基本工具重点难点教学重点：DNA重组技术所需要3种基本工具的作用教学难点基因工程载体需要具备的条件生长快、肉质好的转基因鱼(中国)乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷)过程分析资料分析：位于费城托马斯·杰斐逊大学的希拉里和她的同事成功地将人体狂犬病抗体的DNA译码移入烟草作物中。转基因烟草作物可以产生一种人体蛋白质，而这种物质能抗击致命性的狂犬病病毒。导入：此转基因实验实现了哪种生物的哪些性状在另外哪种生物中表达？性状的表达与我们从前学过的什么过程有关？要实现药物基因在烟草中的表达，要提前做哪些关键工作?学习目标1简述DNA重组技术所需三种基本工具的作

2、用2培养学生自己动手制作模型的能力DNA重组技术的基本工具有哪些？准确切割DNA的工具（“分子手术刀”）——限制性核酸内切酶DNA片段的连接工具（“分子缝合针”）——DNA连接酶基因转移工具（“分子运输车”）——基因进入受体细胞的载体思考分组讨论原核生物为什么没有在长期的进化过程中由于外源DNA的入侵而灭绝，有什么保护机制？限制性内切酶从哪里寻找？1.限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶的作用特点：能识别特定核苷酸序列；从特定部位的两个核苷酸之间切开。限制性内切酶限制酶黏性末端和平末端限制酶所识别的序列有什么特点限制酶所识别的序列，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线

3、，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。分组讨论：2.基因的针线──DNA连接酶切断的DNA片段要与受体细胞的DNA连接，你觉得可以用什么酶？DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同和不同点？阅读思考：DNA连接酶DNA聚合酶连接DNA链连接部位在两DNA片段之间形成磷酸二酯键将单个核苷酸加到已存在的核酸片段的3’末端的羟基上，形成磷酸二酯键双链单链阅读总结限制酶切割后有两种不同的结果，一种产生黏性末端，一种产生平末端。那么恢复它们的连接时，是不是也有两种酶？。黏性末端平末端以下是两种限制酶切割后形成的DNA片段，试分析：①GC…②AATTC…③…GC④…GCG…G……

4、CG…CTTAA(1)其中①和是由一种限制酶切割形成的末端，两者要重组成一个DNA分子，所用DNA连接酶通常是。（2）和是由另一种限制酶切割形成的末端，两者要形成重组DNA片段，所用的连接酶通常是。反馈练习：3.基因进入受体细胞的载体常用的运载体：质粒、噬菌体和动、植物病毒等载体必须具备的条件如果载体对受体细胞有害将怎样？目的基因是否进入受体细胞，没有标记基因我们能否鉴定？假如目的基因导入受体细胞后不能复制将怎样？作为载体没有切割位点将怎样？作为载体的必要条件1、能够在宿主细胞中复制并稳定地保存；2、具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接；3、具有某些标记基因，便于进行筛选。（

5、如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等）4、对受体细胞无害达标练习在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的DNA片段，需使用（）同种限制酶B.两种限制酶同种连接酶D.两种连接酶基因工程常用的受体细胞有（）(1)大肠杆菌（2）枯草杆菌（3）支原体（4）动植物细胞A.（3）（4）B.（1）（2）（4）C.（2）（3）（4）D.（1）（2）（3）不属于质粒被选为基因运载体的理由是A、能复制（）B、有多个限制酶切点C、具有标记基因D、它是环状DNAD补救练习基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是（）A、人工合成目的基因B、目

6、的基因与运载体结合C、将目的基因导入受体细胞D、目的基因的检测和表达C一、基因工程的概念.二、DNA重组技术的基本工具1.限制性核酸内切酶---”分子手术刀”2.DNA连接酶---”分子缝合针”3基因的运载工具——运载体：具备条件本课小结：分类作用来源作用特点结果作业：重组DNA分子的模拟制作。效果分析：