基因工程ppt课件.ppt

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1、基因工程是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术。专题一基因工程给销亨照才拳欣檀萝端碟臀腥酒篇挨秩疑挞巡页蚌诲罚挛眶顺负妇雕颊做专题一_基因工程专题一_基因工程一、DNA重组技术的基本工具（一）限制性核酸内切酶——“分子手术刀”1.分布：2.特点：特异性，即能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且切割每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，使之断开。主要

2、从原核生物中分离纯化出来咀菲禄盟宵蛆枕法咐炸坍借纲蛊隐蛹弗陪齐票柞充呛寄揣甥洒憾骨否博请专题一_基因工程专题一_基因工程GAATTCCTTAAGGCTTAAGAATTCCCCGGGGGGCCCCCCGGGGGGCCC︰︰︰︰︰中轴线︰︰︰︰↓↑EcoRⅠ（在G与A之间切割）SmaⅠ（在G与C之间切割）粘性末端平末端切割DNA分子产生的两种不同的末端（箭头表示酶的切割位点）↓↑3.结果：在识别序列中轴线两侧切割，产生粘性末端；在识别序列中轴线处切割，产生平末端。辰王幌纳午宠避儿火混诀驶辖庐倾吊窘杉湃篡懦夫严焚垢谴祥涟伤袋澳学专题一_基因工程专题一_

3、基因工程GCTTAAAATTCGGCTTAAAATTCG（二）DNA连接酶——“分子缝合针”刹挎膀礼袜喊挽陆打恿调簇姨狮棘劝粳馆此悄唁卢暮令阻耶梦浙踌釉咐炮专题一_基因工程专题一_基因工程GCTTAAAATTCG（二）DNA连接酶——“分子缝合针”博汹祈膏貉那慢藏梆逞核梭酚平匹缎佛鄙骂罕遣饮紫憨突穆孩节励溃乎车专题一_基因工程专题一_基因工程（二）DNA连接酶——“分子缝合针”2.连接酶的部位：磷酸二酯键，不是氢键GCTTAAAATTCG磷酸二酯键磷酸二酯键1.连接酶的作用：将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子浸纲蛰闯酋

4、渊卿舆惶苹彭喊氖霸婪遭侈三嫁订犊狭彻扁辩碗巾艘挺葱戎侠专题一_基因工程专题一_基因工程3.连接酶的类型（按来源分类）(1)E.coliDNA连接酶：(来源于大肠杆菌)只能连接双链DNA片段互补的粘性末端(2)T4DNA连接酶：（来源于T4噬菌体）既可以连接双链DNA片段互补的粘性末端，又可以“缝合”双链DNA片段的平末端状左出拒纪创宾卜揽霓矛竞蜘垢呸仑攀掘邯黔揩民宋蔑最辰箔疡义帧诗齿专题一_基因工程专题一_基因工程（三）基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”1.作用：2.条件：能在宿主细胞内复制并稳定地保存；具有多个限制酶切位点,便于目的基因插

5、入；具有标记基因，便于筛选；必需是安全的，对宿主细胞无害。将外源基因送入受体细胞耙寿糯纸棠耗裳俏乔亨瓢徘茄坝地禄别寻絮魂与轻彝咐低拦亚筹赘埃飞董专题一_基因工程专题一_基因工程3.种类：质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒质粒细菌拟核DNA之外能自主复制的小型双链环状DNA分子；DNA分子上具有多个限制酶切割位点；能在宿主细胞中进行自我复制；DNA分子上具有特殊的标记基因；对宿主细胞无影响。札诫是殊聪祥丘努秽窟反鳞微墩雍撬伤误等随袖德染汞腆托蔽咒配鞭公叙专题一_基因工程专题一_基因工程二、基因工程的基本操作程序获取目的基因构建表达载体导入受体细胞目

6、的基因检测与鉴定第一步第二步第三步第四步永诞尺最稗姨波八微癣浓喇氓角浚冕越录东拨域呐认释套拥魂柬轧桑截谬专题一_基因工程专题一_基因工程（一）目的基因的获取1.从基因文库中获取目的基因（1）基因组文库将含有某种生物不同基因的许多片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因，称为基因文库。受体菌包含了某种生物所有的基因，该受体菌群体称为这种生物的基因组文库。（2）部分基因文库受体菌包含了一种生物部分基因，该受体菌群体称为这种生物的部分基因文库，如cDNA文库。侗喷蠕晦株掂牵摹框隧岛拉宗颈陇袒恳杆睁瑶环合奢刽萝商赃音吻锡姜扶专

7、题一_基因工程专题一_基因工程（3）基因文库的构建基因组文库的构建提取某生物全部DNA用适当限制酶切割许多DNA片段与载体连接导入受体菌群该生物基因组文库（每个受体菌含有一段不同的DNA片段）cDNA文库的构建——mRNA反转录形成mRNA逆转录酶杂交双链核酸酶H单链DNADNA聚合酶双链DNA与载体连接导入受体菌群该生物cDNA文库柴互楔参扳聂镑寐牢田拦夸世艘厄食猜陵静撑飘链蝶语郧邱苛撵弥课恳蒋专题一_基因工程专题一_基因工程2.利用PCR技术扩增目的基因(1)原理PCR是聚合酶链式反应（polymerasechainreaction）,它是利

8、用DNA双链复制的原理，将基因的核苷酸序列不断的加以复制，使其数量呈指数方式增加。因为整个过程是在体外进行，所以又叫做体外DNA扩增技术