动物源食品中残留克伦特罗检测抗体制备与应用

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1、50ChineseJournalofVeterinaryScienceandTechnologyVol.34No.122004动物源食品中残留克伦特罗检测抗体的制备与应用胥传来,贺铁明,王武康,彭池芳,金征宇(江南大学食品学院,江苏无锡214036)摘要:采用重氮化法将盐酸克伦特罗(CL)与牛血清白蛋白(BSA)交联,用紫外扫描和凝胶电泳对交联物鉴定后免疫新西兰纯毛白兔,制备抗血清。经鉴定,抗血清中含有针对CL的抗体,效5价为3.2×10;以此抗体为基础,设计了间接酶联免疫法,该法的检出限为0.096ng/mL,对加于尿液、血液和组织中CL的回收率为80%~120%;通过重复性、

2、灵敏度、准确性等指标对该法进行了评估,并与高效液相层析(HPLC)及国外进口试剂盒进行了比较,表明该法的各项参数均能满足实际检测的需要。关键词:克伦特罗;抗体;酶免疫检测中图分类号:S859.84文献标识码:B文章编号:100026419(2004)1220050205盐酸克伦特罗(CL)的化学名为α2[(叔丁胺基)治疗哮喘和支气管痉挛的药物。近年来,被非法添甲基]242氨基23,52二氯苯甲醇盐酸盐,临床上作为加于动物饲料中以提高动物的瘦肉率,致使CL在动物肌肉和内脏中大量残留,人食用这类动物食品[1,2]后,会造成肝、肾和神经系统损伤。欧美各国早收稿日期:2004210220

3、已禁止将CL作为饲料添加剂使用,我国农业部也基金项目:国家“十五”科技攻关计划项目(2001BA04A18205)于1997年发文明令禁止在动物饲料中添加CL,但作者简介:胥传来(1965),男,江苏省盐城市人,副教有少数养殖户仍违令使用CL,严重威胁着人群的授,博士。健康。gensinthecaninegastrointestinaltract[J].gensdiarrhea[J].ProceedingsoftheAnnualJournalofAnimalPhysiologyandAnimalWalthamOSUSymposiumfortheTreatmentNutrition

4、,1998,80(225):2502252.ofSmallAnimalDiseases,1993,17:28232.[12]TwedtDC.CanineClostridiumperfrin2IsolationanddevelopmentofPCRmethodfordetectionofClostridiumperfringensfromdogPENGJian2guo,QIANGJing2ning,FANGJian2qiang(PoliceDogBaseinKunming,MinistryofPublicSecurity,Kunming650204,China)Abstract:T

5、he18strainsofClostridiumperfringensseparatedfrom12suddenly2dieddogsinfectedwithC.perfringenswereidentifiedastypeAandCbythebiochemicaltestsandthetoxinneutralizationreaction.Sixcouplesofthespecializedprimerscorrespondingrespectivelytoα,β,ε,ι,CPEandβ2oftoxingeneweredesignedandsynthesizedaccordin

6、gtothegeneticsequencesandthepublishedliteratures.ThepurposefragmentsamplifiedbythePCRare233,196,324,446,567and665bpinlengthrespectively.ThedevelopedPCRmethodcanbeusedinbacterialidentificationandtoxindifferentiation,andwasmorerapidthanthemethodfordetectionofbacteriotoxin.Keywords:dog;Clostridi

7、umperfringens;isolationandidentification;PCR中国兽医科技第34卷第12期2004年51目前,我国检测动物源食品中CL残留的试剂制各种溶液:浓缩胶浓度为40g/L,分离胶浓度为盒主要依靠进口,因其价格昂贵,难以广泛应用。为140g/L,电泳电压为200V,电泳后用考马斯亮蓝此,我国“十五”国家重大科技专项“食品安全关键技染色。术”的子课题“兽药残留检测技术”将检测动物源食2.3CL多抗的制备品中CL的ELISA试剂盒的研制列为重点内容。选

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