血库作业指导书.doc

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1、血库工作制度1.输血科（血库）工作人员必须遵守劳动纪律，坚守工作岗位，如有特殊情况需暂时离开，必须向有关人员交接，说明去向、事由、时间并按时返回，杜绝脱岗现象。2.一般输血应预先填写血型申请单测定血型，需输血时再填写输血申请单，各申请单均应由医生逐项填写清楚（包括已测知的血型）。急诊输血亦应同时将血型申请单及输血申请一并送血库，否则应拒收并立即通知有关医生补齐。3.血库人员在收到申请单及血样后，应认真核对申请单上的病人姓名、性别、年龄、住院号、病区、床号及临床诊断，并与血样标签核对是否完全相符，如血样所贴标签与申请单内

2、容不符，应立即退回重送，经核实无误后方可进行血型及配血交叉试验。4.血库人员应严格按操作规范操作，如确遇难以判断的结果，应向科室负责人或有关上级医生报告，并认真复查，直至结果明确无误，方可发血以确保安全。5.如发现采供血机构所发血液的血型标记有误，或标签内容模糊不清，应作好记录，然后通知采供血机构退回复核，并应即时向科室负责人及医务科报告。6.病员血型确定后，原则上应配发同型血。如急症输血，又一时无同型血，可酌情发给O型红细胞，最好是Rh阴性血。紧急发血时，血袋上应标明未完成配血试验，同时，应尽快完成配血试验，如发现配

3、血不合，应立即通知临床医生停止输血。7.备用血液的申请，须按“输血申请和审批制度”严格执行。8.血液一经领出，原则上不得退回。如有特殊原因，且出库时间未超过半小时，血液保存完好，经输血科（血库）检查合格后方可酌情退血。交叉配血（凝聚胺法）1.原理凝聚胺（polymatching）法首先利用低离子介质降低溶液的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，促进血清（浆）中的抗体与红细胞相应抗原结合，再加入带亚电荷的高价阳离子多聚物-凝聚胺溶液，中和红细胞表面的负电荷，缩短细胞间距，形成可逆的非特异性聚集，并使IgG型抗体直接凝集红

4、细胞。加入中和液后，仅由凝聚胺引起的非特异性聚集，会因电荷中和而分散，而由抗体介导的特异性凝集则不会分散。2.标本采集：2.1标本种类：抽取静脉血3-4ml待凝固后分离血清，将细胞配成5％盐水悬液将供血者血样以同样方法分离血清(浆)和红细胞悬液。2.2标本要求：抗凝和干燥管均可，如用抗凝血主张用EDTAK2（mg/dz）抗凝标本应无溶血，切标签齐全。3.标本储存：急诊标本30分钟内完成操作，标本应至4℃冰箱保存7天。4.标本运输：室温运输。5.标本拒收标准：细菌污染。溶血标本，标签不齐全不能作测定。6.试剂：6.1试剂

5、名称：凝聚胺试剂(polymatching)6.2试剂生产厂家：(台资)珠海贝索生物技术有限公司。6.3试剂组成：试剂1.低离子介质(LowLonicMedium，LIM).试剂打开使用后，可置室温贮存，未开封者2-10度贮存，有效期为2年。试剂2.凝聚胺溶液(PolybreneSolution).贮存及有效期同上。试剂3.重悬液(ResuspendingSolution).贮存及有效期同上。试剂4.8.5％生理盐水。7.仪器：7.1血型血清索离心机：XTL-4.7上海离心机械研究所7.2离心机：上海手术器械厂7.3电

6、热恒温水箱：北京长源实验设备厂7.4显微镜：OLYMPUS(日本)8.操作步骤及结果判断：8.1供受者红细胞用生理盐水配成3-5％的细胞悬液。加样量均为：血清2滴，红细胞悬液1滴。主管：受血者血清+供者红细胞悬液;次管：受者红细胞悬液+供者血清;(阴阳对照管另设)。8.2各管分别加低离子介质0.6ml混匀置室温1分钟。加凝聚胺溶液2滴，混匀，置室温15秒。8.31000g(3000rpm)，离心18秒，弃上清液，管底保留约2滴液体。轻摇试管，观察是否形成凝块。如未形成凝块，则重做前面试验。8.4加入2滴重悬液，轻轻混合

7、，肉眼或显微镜下观察结果。8.5凝块在1分钟内分散，试验结果为阴性，供受者血液配合;反之，如依照为不同强度的凝块，试验结果判为阳性，供受者血液不配合。实验结果必须在3分钟内判读。9.操作性能：快速简便，特异性强，灵敏度较高，重复性好。10.超出范围结果处理：10.1细胞自凝：在冬天气温较低时，某些病人血清中含有冷凝集素而导致交叉配血假阳性;遇此现象可用37℃-40℃生理盐水洗涤红细胞并置37℃水溶中轻轻摇动，观察结果。10.2若病人血清(血浆)含有肝素，如洗肾患者能影响配血，须多加4-6滴polybrene溶液以中和肝

8、素。10.3红细胞悬液为5％为宜，过浓或过淡可使抗原抗体比例不适当，反应不明显易误判。10.4各种原因引起的红细胞溶解，误判为不凝集，部分溶血时，可溶性血型物质中和了相应的抗体。11.方法局限性：11.1试管，滴管吸头和玻片必须清洁干燥，防止溶血。11.2操作方法应按规定，先加血清，然后再加红细胞悬液，以便容易核实是否漏加血清。1