第四章 食品毒理学实验基础.ppt

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1、第四章食品毒理学实验基础第一节：常见实验动物选择和处理（一）实验动物的定义及其在科学研究中的意义1．定义：★实验动物（LaboratoryAnimalSciences）：由人工选育，在一定条件下繁殖生产，具有明确的遗传背景和生物学特性，专门用于科学研究并符合一定标准的各种动物。★实验动物种类：很多，常见包括：大鼠、小鼠、豚鼠、家兔、狗、猫、猴、小型猪、鸡（SPF鸡）、青蛙、蟾蜍、鱼类等。★实验动物的特点：①具有较小的个体差异，较强敏感性，较好的重复性与较一致的反应性。②一些遗传背景不清楚，携带病原微生物不明确，健

2、康状况及个体差异较大，反应性不一致，一般不作为实验动物，其所取得的数据不被科学界所公认。2．意义实验动物是生命科学（生物、医学、食品等）研究的重要基础和支撑条件，在科研、教学、生产、检定、安全评价和成果评定中都离不开实验动物，被称为“活的仪器”，“活试剂”。英国一位科学家曾这样比喻：“在生命科学研究中使用实验动物就象在分析化学中使用分析天平一样重要”。实验动物在科学研究中占有重要地位。美国生命科学研究课题投资40%涉及实验动物，60%的生物学课题需要实验动物。如美国肿瘤研究中心，每年研究经费2.2亿美元，利用实验

3、动物的课题占1.4亿美元。我国生物医学科研课题也有60％上使用实验动物。实验动物的品种品系“种”，是生物学上的一个基本分类单位，是自然选择的产物。“品种”，则是应用动物学上的一个基本分类单位，尤其是畜牧学与实验动物科学，“品种”是人工选育的产物。实用性遗传的稳定性同质性具有一定的数量“品系”：来源于同一优良品种祖先的后裔群。形成品种的条件实验动物的级别分类级别分类，一般是按实验动物的微生物背景划分的，这是实验动物质量控制的一个重要方面。国际上一般分为四级：无菌动物（germfreeanimal,GF）悉生动物（g

4、notobioticanimal,GN）无特定病原体动物（specificpathogenfreeanimal,SPF）普通动物（conventionalanimal,CV）对微生物的控制要求GF：以无菌技术获得，不带任何微生物和寄生虫，在隔离系统饲养。GN：带有明确的微生物丛，无菌条件饲育，在隔离系统饲养。SPF：不带指定的病原微生物和寄生虫，在屏障系统饲养。CV：微生物、寄生虫携带性情况不明，但不能带有人畜共患和烈性传染病原体。在开放系统饲养。我国对实验动物级别分类（1994年国家技术监督局发布的国标）一级：

5、CV(conventionalanimal)二级：CL（Cleananimal）三级：SPF(specificpathogenfreeanimal)四级：GF(germfreeanimal)1．CV开放系统，普通饲养，大批生产，成本低，是最低级别的实验动物。CV广泛应用于教学、预试验及一些要求不严的短期试验，生物制品生产。严格意义上讲，CV不适合于科学研究。尽管如此，CV祖先来自于SPF，剖腹产后普通化，即开放饲养，CV在饲料配方，饮水，室内温、湿度、光照、噪声仍应符合国家标准。市售和来历不明的动物为“无证动物”

6、，试验结果不予承认。2．CL：祖先仍是SPF或GF，屏障系统饲养。质量控制要求介于CV与SPF之间。国外无此级别，国外一般均采用SPF或GF。国内由于发展水平条件所限，作为一种过渡，暂可作为标准实验动物用于一般的科学研究。3．SPF属健康无病动物，动物质量高，适合长期慢性实验，并能取得可靠实验结果。广泛应用于药学、毒理学、肿瘤学、免疫学、传染病学、多种诊断和疫苗生产，以及生物制品鉴定中。屏障系统：空气经过一定的过滤净化，饲养环境保持正压，进入系统的一切物品：饲料、饮水、用具等均需经严格灭菌处理。工作人员进出消毒，

7、衣、帽、手套、口罩均需消毒。饮水除高压消毒外，还应酸化和过滤净化。SPF饲养环境应在绝对屏障系统——隔离器中内部空气全部由送风装置供给，并经过滤除菌，内部保持正压，利用空气梯度压力来防止外界空气进入。工作人员进入需淋浴，衣、帽、手套、口罩均需消毒，各种用品消毒，方可进入。动物饲养架及饲养盒，以连续层流（空气经初、中、高三级过滤后流入架内，在架内外形成空气压力差，在饲养层等形成一个足以抵微尘进入架内的清洁区）和空气净化，以实现空气净化的双保险作用。4.GFGF:无菌剖腹产，在绝对隔离器中养育。（塑料薄膜无菌隔离器）

8、应用：①在实验动物领域应用；②在免疫学方面应用：是研究免疫发生机理与生产高效优质疫苗的最理想动物。③用于微生物学研究：研究微生态学的最理想的动物模型。④肿瘤学研究：是研究致癌机理，防癌、抗癌药物筛选的理想动物。⑤营养学研究：是研究营养学的良好模型。GF动物不仅用来观察肠道内细菌对代谢的影响，还用于研究限制采食，对寿命，免疫力的影响，无菌动物对诸多营养机理的分析将起到更重要