连翘籽综合利用的分析.docx

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1、连翘籽综合利用的分析连翘Forsythiasuspense(Thunb.)Vahl.为木犀科连翘属植物。连翘以野生为主,受抢青和气候因素的影响,药材质量无法保证,栽培是解决连翘药材质量的最佳方法,高质量的种子是连翘规范化栽培的前提。目前,大量连翘成熟种子被弃出,造成了资源浪费。本文考察了连翘种子的质量检验方法,并制定出连翘种子质量分级标准。通过HPLC分别进行连翘种子(即为连翘籽)和果壳中有效成分的含量测定,采用GC-MS分析连翘种子脂肪油各成分的相对含量,并对连翘种子、果壳以及连翘籽油的抗炎、抗病毒、抗氧化的活性进行了研究,

2、为连翘籽的综合利用提供依据。研究结果如下:1.连翘种子质量检验方法的研究表明,检验前连翘种子应过14目筛,去除杂质和瘪粒。扦样量应不少于12.2g,净度分析是将净种子与杂质分开并称重计算净度,千粒重可采用百粒法测定,高恒温粉碎(130±2)℃烘干5h法测定水分含量,0.2%TTC溶液(35±1)℃避光染色5h测定生命活力,连翘种子萌发不需要层积,发芽率测定时可直接用25℃恒温光照双层滤纸床进行。2.依据K-聚类结果,并结合生产实践,选取净度、含水量、千粒重、胚率及发芽率等5项指标作为分级标准。连翘种子可以分为三级:一等连翘种子

3、净度≥90%,胚率≥90%,含水量≤10%,千粒重≥3.9g,发芽率≥85%;二等连翘种子净度≥80%,胚率83%~89%,含水量≤10%,千粒重3.2g~3.8g,发芽率74%~84%;三等连翘种子净度≥70%,胚率≥72%,含水量≤10%,千粒重≥3.1g,发芽率≥54%。3.采用HPLC分别对13批不同产地的连翘籽、果壳中的连翘酯苷A和3种木脂素类成分(松脂醇-β-D-葡萄糖苷、连翘苷、连翘酯素)进行含量测定,结果表明连翘果壳中的连翘苷含量大多未达到药典标准,且连翘籽中3种木脂素的含量均低于果壳。但连翘籽中连翘酯苷A的含

4、量明显高于果壳,加入连翘籽可明显提高老翘中连翘酯苷A含量。4.测定连翘籽油的理化性质,发现其相对密度为0.95g/cm~3,酸值为1.08mgKOH/g,过氧化值为0.12%,皂化值是121.74KOH/g,碘值是160.20g/100g。连翘籽油通过GC-MS测定分析,其主要成分为亚油酸(60.583%),油酸(24.160%),乙酸松油(5.600%),硬脂酸(1.867%),α-萜品烯(0.606%),D-柠檬酸(1.244%)以及松油烯-4-醇(1.430%)等,脂肪酸为连翘籽油的主要成分。5.本研究以小鼠RAW264

5、.7细胞为模型细胞,LPS诱导活化并建立体外炎症模型,MTT法检测细胞毒性,连翘籽、果壳提取物及连翘籽油在浓度为1.6~16.6μg/mL范围内对小鼠RAW264.7细胞无毒副作用;ELISA法检测IL-1β、TNF-α炎症因子水平,连翘籽、果壳提取物及连翘籽油在浓度1~5μg/mL范围内有抗炎效果并呈剂量依赖性,且连翘籽抗炎效果较显著;神经氨酸酶抑制剂筛选试剂盒检测连翘籽、果壳以及连翘籽油的抗流感病毒活性,得出连翘籽、果壳提取物的NA抑制效果较好;DPPH法和超氧阴离子自由基清除实验结果表明,三者均有抗氧化活性,为综合分析和

6、利用连翘籽资源提供理论依据。