玉米茎尖分生组织丛生芽高频诱导和再生体系建立.docx

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1、玉米茎尖分生组织丛生芽高频诱导和再生体系建立玉米是世界三大粮食作物之一,转基因是提高玉米产量和品质的有效方法。成功的转基因体系依赖于良好的受体系统。目前,幼胚仍然是玉米转化受体系统中最重要的外植体。而由成熟胚茎尖分生组织诱导而来的丛生芽与传统的幼胚相比,具有不受季节限制,诱导率高,再生植株无变异等优势。如何高频的诱导丛生芽并再生成为完整植株正是本课题的研究目的所在。本研究主要获得的结果有以下几点：1、以CML295茎尖分生组织为受体材料,根据实验所得浓度范围分别配制8种含有不同浓度6-BA和2,4-D的诱导培养基进行诱导,每种培养基包含3次

2、重复试验,并最终以诱导频率的高低作为评价标准进行极差分析,诱导频率最高达到63%。2、以3.5：0.5和3.0：0.5两种诱导培养基上诱导出的丛生芽为对象,研究丛生芽的继代和扩繁能力。3.5：0.5诱导培养基上的丛生芽能继代培养6个月左右,后期扩繁能力较差：3.0：0.5诱导培养基上的丛生芽可以继代12个月左右,后期仍具有一定的扩繁能力：而在3.5：0.5诱导培养基上诱导并在3.0：0.5诱导培养基上继代培养的丛生芽在继代16个月后仍有较好的生长状态和较高的增殖能力。3、通过对各诱导培养基上所诱导出丛生芽的质量进行对比分析,建立丛生芽质量评

3、价标准。将诱导频率,增殖速度和诱导质量等因素相结合,得到6-BA浓度为3.2mg/L,2,4-D浓度为0.5mg/L的诱导培养基最为适宜4、用不同生长时期的丛生芽制作样品进行扫描电镜观察。观察到诱导前、中、后期三个阶段芽组织及周围幼叶的不同形态特征。诱导前期茎尖生长不明显；中期形成瘤状突起,幼叶上有少量纤毛状突起；后期丛生芽形成,幼叶上布满纤毛状突起。5、丛生芽诱导完成后,分别取继代培养2个月、4个月和6个月的丛生芽块进行分化再生,得到的结果是继代培养2个月的丛生芽分化培养20天的分化率达到80%,生根率60%,继代培养4个月的丛生芽分化率

4、为50%,而培养6个月的丛生芽短时间未能分化成苗。到到到