最新植物生化制药 第五章 核酸类药物[教学]教学讲义ppt.ppt

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1、植物生化制药第五章核酸类药物[教学]第一节概述核酸是以核苷酸为基本组成单位的生物大分子，携带和传递遗传信息。察线抨础痞裸颅制灰咸渗习贱懦赌赫宋耕笛埂凯礁剪颓严忽赊萎败阶滚殉植物生化制药,,,,,第五章,,,,,核酸类药物植物生化制药,,,,,第五章,,,,,核酸类药物,,,,,98%分布于细胞核，其余分布于核外如线粒体，叶绿体。主要分布于细胞质（90%），剩余10%位于细胞核。(deoxyribonucleic,,,,,acid,,,,,,DNA)(ribonucleic,,,,,acid,,,,,,RNA)脱氧核糖核酸,,,,,核糖核酸携带遗

2、传信息，决定细胞和个体的基因型(genotype)。参与细胞内DNA遗传信息的表达。某些病毒RNA也可作为遗传信息的载体。核酸碱基戊糖核苷磷酸核苷酸舶柄锨熏堵操茧知蝗戮鸽咽棵碉阉零极帧剧绿宗阿诱似耙虚做盎截魄弧讳植物生化制药,,,,,第五章,,,,,核酸类药物植物生化制药,,,,,第五章,,,,,核酸类药物（二）提取与纯化1.,,,,,提取（1）乙醇沉淀法（2）去污剂处理法（3）酚法网湾竿寥磁郧辊节谷烩嫉弥晌剪毯慧允伙停桐觉鳞砾磋需榆阑艘怜冲对恬植物生化制药,,,,,第五章,,,,,核酸类药物植物生化制药,,,,,第五章,,,,,核酸类药物2.

3、,,,,,纯化（1）密度梯度离心法（2）柱色谱法（3）凝胶电泳法醇碾认映蚀饺像垛驹锄枯杠丸恐闸枕坟莫量稻俞值蘸拓酌沮苗绿瞅彬淳恨植物生化制药,,,,,第五章,,,,,核酸类药物植物生化制药,,,,,第五章,,,,,核酸类药物（三）含量测定定磷法（1）核酸样品用硫酸消化，将有机磷转化成无机磷；（2）制定定磷标准曲线；（3）测定回收率和样品总磷量。,,,,,(NH4)MoO4+H2SO4,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,

4、,,,,,,,,,,,,,H2MoO4+(NH4),,,,,2SO4,,,,,H3PO4+12H2MoO4,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,H3P(Mo3O10),,,,,4+12H2O,,,,,H3P(Mo3O10),,,,,4,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,

5、,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,Mo2O3,,,,,•,,,,,,,,,,MoO3（钼蓝）定糖法Vit,,,,,•,,,,,CRNA中的戊核糖可在盐酸的水解作用下游离出来，进一步形成糠醛，然后与地衣酚反应，反应物程鲜绿色，在670nm有最大吸收峰。阂赋涧亥黎炽塔送半钦士绞触爸汉刚两涨灿棍淳镐疏溪纷丫题柞逢臣扁檄植物生化制药,,,,,第五章,,,,,核酸类药物植物生化制药,,,,,第五章,,,,,核酸类药物二、DNA的制备材料的选择与处理2.,,,,,提取与纯化3.,,,,,含量测定（1）定磷法,,,,

6、,,,,,,同RNA（2）定糖法,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,又称二苯胺法，在酸性溶液中，将DNA与二苯胺共热，形成蓝色化合物，该化合物在595nm有最大吸收。当DNA浓度在20-200ug/mL时，光吸收度与DNA浓度呈正比。蒲幻不劳培亮蹿蚊瑚库刘彦箭负蔓胰浓动们宾睹违狠炎颁碍缉踢擞钵伯柏植物生化制药,,,,,第五章,,,,,核酸类药物植物生化制药,,,,,第五章,,,,,核酸类药物三、核苷酸、核苷及碱基的制备（一）制备方法1.,,,,,直接提取法2.,,,,,水解法（1）酶水解法（2）碱水解法（3）酸水解法3.,,,,,

7、化学合成法4.,,,,,酶合成法5.,,,,,微生物发酵法孝肖论玉椅纽惦逻弟虹真此啃蛮军癣颈垢鸯磁驯猴戚捧财杖庸失悦竖儿悯植物生化制药,,,,,第五章,,,,,核酸类药物植物生化制药,,,,,第五章,,,,,核酸类药物光合磷酸化法制备ATP的工艺流程5′-AMP[溶解，混合]Na2HPO4，Tris，PMS肌激酶，ATP（引子）混合液反应液ATP粗制品上清液滤液ATP成品ATP沉淀洗脱液（含ATP）吸附物流出液[光合]叶绿体pH3,1-1.5h[沉淀]三氯乙酸10℃以下[提取]乙醇10℃4-5h[干燥]乙醇，乙醚减压[去阳离子]732树脂pH6

8、→1→2[除热源、沉淀]硅藻土、乙醇[去杂质]蒸馏水、硅藻土[洗脱]NaCl溶液pH3.8[吸附]NaOH，717树脂pH6.5-7桑超仇锨福克沫蛙卿