最新病毒的接种教学讲义ppt课件.ppt

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1、病毒的接种实验目的了解病毒的培养方法掌握病毒的鸡胚绒毛尿囊膜接种法及小鼠脑内接种方法。概述病毒结构简单，缺乏完整的酶系统，不能在无生命的人工培养基中生长，必须在活的组织细胞中才能增殖。动物接种法鸡胚培养法组织细胞培养法常用的分离、培养、鉴定病毒的方法鸡胚接种接种途径可根据病毒种类选择适宜接种部位，如分离流感病毒常用羊水囊和尿囊同时接种法，而痘病毒常采用绒毛尿囊膜接种法尿囊腔接种法卵黄囊接种法绒毛尿囊膜接种法羊膜囊接种法气　室鸡　胚卵黄囊尿囊腔羊膜腔绒毛尿囊膜卵　白卵膜判断鸡胚是否存活⑴在检卵灯下观察能否看到清晰的血管；⑵胚胎是

2、否移动；⑶若胚龄过长，则需观察其胎盘部分，胎盘部分变苍白说明胚胎死亡，正常时胎盘发暗，蛋白部分透亮。绒毛尿囊膜接种法定位：将胎盘部分及自然气室部分用铅笔画出，在胎盘与蛋白交界处（无血管区）画一直径约1cm的等边三角形。卵窗气　室鸡　胚卵黄囊尿囊腔羊膜腔绒毛尿囊膜卵　白卵膜取卵壳：消毒后取下所画三角形区域的卵壳，注意卵膜不要碰破，于卵膜中央刺一小口（不要伤及绒毛尿囊膜），造人工气室：在自然气室部分用大注射器针头钻一孔，用橡皮头自气室端小孔将气室中空气吸出，使绒毛尿囊膜下陷形成一“人工气室”接种：去除卵膜，于绒毛尿囊膜上滴上病毒0

3、.1~0.2ml。封口：用胶布封口，胶布事先用碘酒消毒，并通过火焰烧去余碘。培养：放入温箱培育4天，然后收获病毒。真菌菌落的观察（示教）真菌培养营养要求不高，在一般培养基上能生长常用沙保弱（Sabouraud）培养基（含4%葡萄糖、10%蛋白胨、琼脂），真菌的最适酸碱度是pH4.0~6.0，最适生长温度浅部真菌22~28℃，深部真菌37℃。真菌菌落类型酵母型菌落（yeastcolony）菌落光滑、湿润。无菌丝隐球菌菌落类酵母型菌落（yeast-likecolony）外观和酵母型菌落相似，显微镜下可看到假菌丝白色念株菌菌落丝状型

4、菌落（filamentouscolony）菌落系由多细胞菌丝体所组成大多数丝状真菌或霉菌的菌落新型隐球菌：菌落属酵母型菌落，圆形、较大、白色、边缘整齐，表面湿润光滑，与一般细菌菌落相似。白色念珠菌：菌落属类酵母样菌落，圆形、较大、白色、菌落底层有假菌丝长入培养基内。絮状表皮癣菌：菌落属丝状菌落，在沙保琼脂斜面培养基上菌落开始为白色，颗粒状，以后变为绒毛样甚至粉末状，有许多辐射状沟，呈草绿色，且培养基常有皱裂。石膏样小孢子菌：菌落属丝状菌落，在沙保培养基上菌落为棉絮状、羊毛状或粉末状。注意事项消毒小白鼠时不要碰到眼睛注射时不要扎

5、的太深以免刺伤对侧手指磨卵壳及钻孔时力量要适中看过的鸡胚不要倒入水池，倒入指定的大烧杯中抗结核治疗中的药物性肝损害药物性肝损害定义由于药物或其代谢产物的毒性作用或机体对药物产生过敏反应对肝脏造成损害，即为药物性肝损害。引起肝损害的临床常用药物有抗生素和抗菌药物、解热镇痛和抗痛风药、抗癌药和免疫抑制剂、神经精神药物、循环和消化系统药物、中草药及其它药物。其中最常见是抗结核药物。药物性肝损害的发生机制★药物的固有毒性引起，有剂量依赖性的，在用药和发生肝损害之间有相对固定的潜伏期★用药者的特异体质导致,与遗传素质密切相关，再次给药

6、后立即复发；多伴随发热、皮疹和血液中嗜酸性细胞增多等药物过敏反应常见的临床表现。药物性肝损害诊断标准：　1、用药1～4周(或更长时间)出现肝损害的表现;2、初发症状可有发热、皮疹、瘙痒等;3、周围血象嗜酸粒细胞>6%;4、巨噬细胞或淋巴细胞转化试验阳性;5、有肝内瘀胆或肝实质损害的病理和临床征象;6、HBsAg、抗-HBC、抗-HAVIgM、抗-HCV、抗-HDV、抗-HEV均阴性;7、再次给药又发生肝损害。如有1加上2～7中的任何2条,即可诊断为药物性肝损害。对原有肝病病情稳定,但应用某些药物后肝损害加重,也

7、考虑与药物有关。肝损害的严重程度是根据血清转氨酶的最高值，按照WHO药物毒性反应分类标准判定：★轻度肝毒性反应为AST或ALT增高至正常上限值的3-5倍；★中度为增高至正常上限值的5-10倍；★重度为增高至正常上限值的10倍以上。抗结核药物所致肝损害定义为无症状或有食欲不振、恶心、呕吐或腹痛等肝炎症状，血清AST或ALT高于正常上限值的3倍。抗结核药物所致肝损害的危险因素有老年、既往肝病史、治疗前血清转氨酶升高、慢性酒精中毒、营养不良、并用其它药物、某些遗传因素或吸毒等。临床症状主要有乏力、纳差、恶心、呕吐、肝区不适、肝

8、区疼痛、腹胀、皮肤、巩膜黄染、尿黄等。谷丙氨酸转移酶(ALT)、天冬氨酸转移酶(AST)、碱性磷酸酶（ALP）、总胆红素(T-BIL)、间接胆红素(I-BIL)、直接胆红素(D-BIL)等肝功能指标高于正常,B超示肝脏弥漫性损伤。异烟肼异烟肼对肝脏的损伤与患者的个体特异性有关