对两种浓度腺嘌呤诱导肾阳虚不育大鼠评估

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1、对两种浓度腺嘌呤诱导肾阳虚不育大鼠评估  摘要:目的对两种浓度(200mg/Kg/d与300mg/Kg/d)腺嘌呤诱导肾阳虚不育大鼠的评估。方法将18只成年雄性SD大鼠随机分成三组,正常对照组、模型A组(200mg/Kg/d)和模型B组(300mg/Kg/d),每组6只。对照组与模型组分别予以蒸馏水和腺嘌呤灌胃21d。观察大鼠体征、血清性激素、血清肌酐、血清尿素氮、睾丸与肾脏重量及精子密度的变化。结果与正常对照组相比,2个模型组睾酮、雌二醇、体重、睾丸重量与精子密度明显降低(P0.05),血清肌酐、血清尿素氮与肾脏重量明显升高(P0.05)。结论两种浓度腺嘌呤均可成功诱导

2、肾阳虚不育模型,较高浓度腺嘌呤对抑制精子发生具有明显作用。关键词:腺嘌呤;肾阳虚;不育;大鼠中图分类号:R285.5文献标识码:A祖国医学对治疗不育症有其独特优势,腺嘌呤诱导肾阳虚不育动物模型是研究不育最常用的动物模型。本研究探讨两种常用腺嘌呤浓度(200mg/Kg/d与300mg/Kg/d)对肾阳虚不育大鼠建模的评估。1资料与方法1.1一般资料41.1.1实验动物SD雄性大鼠,体重280~300g,18只,清洁级(由广西中医药大学动物实验中心提供)。1.1.2药品及试剂腺嘌呤(Sigma公司),睾酮(testoterone,T)、黄体生成素(luteotrophicho

3、rmone,LH)、卵泡刺激素(follicle-stimulatinghormone,FSH)、雌二醇(estradiol,E2)放射免疫分析试剂盒(北京北方生物技术研究所)。1.2方法1.2.1分组及建模大鼠适应性喂养1w后,随机分成三组:正常对照组、模型A组(200mg/Kg/d)和模型B组(300mg/Kg/d),每组6只。正常对照组按2mL/d剂量予以蒸馏水灌胃,模型组每次给药前称体重,A、B组分别按200mg/Kg/d与300mg/Kg/d计量并用蒸馏水制成2mL混悬液灌胃,灌胃21d。停止灌胃后第2d处死动物,期间或建模后做下列检测。1.2.2指标检测①每天

4、测量体重(确定腺嘌呤用量)、饮食量及尿量,观察动物一般情况。②性激素及肾功能的检测:戊巴比妥麻醉后,腹主动脉取血7~8mL,血标本凝集后取血清2~3mL,用放免法检测T、LH、FSH与E2,生化检测技术检测血尿素氮(bloodureanitrogen,BUN)与血清肌酐(serum4creatimine,SCr)含量。③睾丸与肾脏器官称重。④精液的提取和分析:将附睾取出,在其头和尾各沿纵向垂直剪2次,用营养液2mL孵育10min,进行精子密度分析。1.2.3统计学分析计量资料用(x±s)表示,数据统计采用SPSS13.0forWindows软件进行统计学分析。2结果2.1

5、一般状态观察正常对照组大鼠发育正常,体重不断增加,对外界刺激反应灵敏、活动正常,毛发润泽光滑。2个模型组灌胃1w后,大鼠都出现畏寒肢冷,蜷缩拱背;2w起活动减少,反应迟钝,饮食差,体毛枯疏,失去光泽,并开始出现脱毛,阴囊皱缩,睾丸回升,肛周污染。模型B组在灌胃第3d出现多尿,模型A组在灌胃第9d出现多尿。两组模型组体重明显减少,持续到死亡或结束实验。正常对照组无死亡,模型A组在第3w内死亡2例,模型B组在第1w内死亡1例、第2w内死亡1例、第3w内死亡2例,见表1,图1。实验中死亡的动物经尸体解剖检查,肺组织中未发现药液及出血点,排除因灌胃操作失误造成死亡。而每只死亡大鼠

6、均出现大白肾,有的肾表面有出血点。2.2血清检测指标变化比较与正常对照组比较,两组模型组E2、T显著降低(P0.05)。2个模型组之间E2、T、BUN、SCr、FSH与LH无明显差异(P>0.05),见表2。2.3精子密度与睾丸与肾脏器官称重42个模型组的肾脏重量明显高于正常对照组,睾丸重量与精子密度明显低于正常对照组(P0.05),模型B组的精子密度明显低于模型A组(P4

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