种子学chapter6.7 种子生活力测定.ppt

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1、第六章种子检验原理和技术一、种子生活力的概念和测定意义概念:种子生活力(seedviability)指种子发芽的潜在能力或种胚所具有的生命力。意义:1.休眠种子必须进行生活力测定2.快速预测种子发芽能力第七节种子生活力测定二、种子生活力四唑染色测定(一)四唑测定的发展简史1942年德国SocaledHoheneim学校的H.Lakon(莱康)教授发明Prof.Dr.GeorgLakonInventthetopographicaltetrazoliumtest1939-1942ChairmanofISTAForestTreeSeedCom

2、mittee1928-1950ChairpersonsoftheISTATetrazoliumCommitteeLakonGermanyLindenbeinGermanyBulatGermanyMooreUSAOveraNorwayButlerAustraliaLeistGermanyMartinelliArgentineKrämerGermany1950年ISTA成立四唑测定技术委员会1953年爱尔兰都伯林ISTA世界大会第一次把四唑测定列入国际种子检验规程,并规定7个属和1个种的林木种子可应用该法测定生活力。1956年法国巴黎、19

3、59年挪威奥斯陆、1962年西班牙里斯本、1965年德国慕尼黑,先后4次做了重大的修订和补充,于1966年正式公布17个属和11个种的林木种子可采用四唑染色法测定生活力。1972年在挪威的奥斯陆会议上扩大到农业种子的应用1984年由ISTA瑞士秘书处正式公布发行《四唑测定手册》(HandbookOnTetrazoliumTest),汇集了全世界最先进和实用的种子四唑测定技术和650多个属和种的农业、蔬菜、林木、牧草、药材和花卉种子的具体测定技术VolumeII,1stEdition,2003VolumeII-TreeandShrubSp

4、ecies ByN.LeistandS.KrämerIllustratedbyJ.PfäfflinISTAWorkingSheetsonTetrazoliumTesting,VolumeI,1stEdition,2003VolumeI-Agricultural,VegetableandHorticulturalSpecies ByN.LeistandS.KrämerIllustratedbyJ.Pfäfflin(二)四唑测定的特点1.原理可靠2.结果准确3.不受休眠限制4.方法简便5.省时快速6.成本低廉(三)四唑测定的适用范围1.测定

5、休眠种子的发芽潜力;2.测定收获后要马上播种的种子的发芽潜力;3.测定发芽缓慢种子的发芽潜力;4.测定发芽末期未发芽种子的生活力;5.测定种子收获期间或加工损伤的种子生活力;6.查明发芽试验中不正常幼苗产生的原因和杀菌剂处理或种子包衣等的伤害;7.查明种子贮藏期间劣变、衰老程度;8.时间紧迫,调种时快速测定种子生活力。(四)应用的化学试剂1.四唑的理化性质2,3,5—氯化(或溴化)三苯基四氮唑(四唑或红四唑),英文名为2,3,5-TriphenylTetrazo1iumChloride(orBromide),缩写TTC(TTB)或TZ。

6、分子式为C19H15N4Cl,结构式如图5.1,分子量334.8,为白色或淡黄色的粉剂,熔点243℃,易溶于水,具有微毒。2.磷酸缓冲液(phosphaticbuffersolution)要求pH值在6~7范围之内。配制四唑染色溶液时,常用磷酸缓冲液来溶解。(1)ISTA法首先配两种母液,然后按比例混合。母液I:称取9.078gKH2PO4溶解于1000ml蒸馏水;母液Ⅱ:称取9.472gNa2HP04或11.876gNa2HPO4·2H2O溶解于1000ml蒸馏水之中。然后取母液I2份和母液Ⅱ3份混合即成。(2)AOSA法在1000m

7、l蒸馏水中加入5.45gNaH2PO4和3.79gNazHPO4,充分溶解即成。3.乳酸苯酚透明液(1actophenolclearingso1ution)用于小粒豆类和牧草种子染色测定的。经四唑染色后使种子种皮、稃壳或胚乳变为透明,以便透过这些部分清楚地观察其胚主要构造的染色情况。取20ml乳酸、20ml苯酚(若苯酚是结晶形式,则需溶化为液体)、40ml甘油和20ml水配成。该药液有毒性,最好戴塑胶薄膜手套配制,并在通风橱里操作。在使用时谨防触及皮肤或衣服等。注意4.H202(hydrogenperocidesolution)用于某些

8、牧草种子(如黑麦草和早熟禾等)的预湿浸种,以加快酶活化和吸胀。一般用0.3%H202溶液。5.杀菌剂和抗生素(fungicidesandantibiotics)四唑溶液里或染色样品中加入微量的杀真菌剂和(或

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