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时间：2022-01-08
《细胞表面黏附分子的荧光标记及观察》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、细胞表面黏附分子的荧光标记及观察细胞生物学实验东北师范大学生命科学学院2009年4月29日赵佳实验原理(一)------粘附分子滚动激发牢固粘附越出血管功能举例：参与炎症过程中白细胞与血管内皮细胞粘附什么是粘附分子？是一类介导细胞间、细胞与胞外基质间相互接触和结合的膜表面糖蛋白。实验原理(二)------免疫荧光标记抗体（一抗）荧光物质（二抗）待检抗原间接免疫荧光直接免疫荧光时间特异性实验目的了解细胞表面粘附分子掌握直接免疫荧光标记的方法实验步骤1．收集生长状态良好的悬浮细胞Jurkat，1200rpm离心5min，弃上清。细胞沉淀不要丢失2．1m
2、lPBS重悬细胞，1200rpm离心5min，弃上清。加200μlPBS重悬细胞，等体积加入多聚甲醛固定液，室温固定15min。3．2000rpm离心5min，弃上清。4．1mlPBS重悬细胞，洗涤残留的多聚甲醛，2000rpm离心5min，弃上清。5．50μlPBS重悬细胞。细胞悬液中加入1μFITC标记的一抗，混匀。室温作用30min。避光6．PBS重悬细胞，洗涤未结合的抗体分子，2000rpm离心5min，弃上清。7．50μlPBS重悬细胞，取10～20μl悬液滴于载玻片上，盖片后，荧光显微镜观察。在显微镜室滴加细胞生物学实验东北师大生科院注
3、意事项移液枪的使用吸一打二，慢吸快打。不能倒置。枪身防腐蚀。用后枪头立即打掉。用前看量程，不能拧过量程。细胞表面黏附分子的荧光标记及观察预期结果作业与思考记录实验结果。进一步了解粘附分子。谢谢大家
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