卵磷脂的生产

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1、卵磷脂的生产项目原理卵磷脂可在植物的水化油或动物的脑和蛋黄中提取,尤以蛋黄中含量最高..卵磷脂不溶于极性溶剂,尤其是丙酮,故常以丙酮作为卵磷脂的沉淀剂.丙酮可除去卵磷脂中的油，脱去多余的水,同时因细胞结构成份的破碎使蛋白质与脂质结合的某些化学键打开，促使某些结合酶释放到溶液中在乙醇浓度大于95%前，提取剂的性质和卵磷脂的性质越来越相似,使卵磷脂在其中的溶解度增加.但当用无水乙醇时，提取剂的极性过强,造成卵磷脂溶解度降低,所以选用95%的乙醇提取最好。项目器材与试剂仪器：电热恒温水浴；强力电动搅拌器；旋转蒸发器；真空干燥箱；薄层色谱扫描仪；冻干机试剂：无水

2、乙醇、95%乙醇、乙醚、丙酮、氯仿、甲醇、钼酸铵、硅胶G、羧甲基纤维素Na（以上试剂均为分析纯）鸡蛋项目步骤概述以鸡蛋的卵黄为原料，采用含水乙醇与乙醚提取，通过丙酮脱水去油，得到粗品卵磷脂；进一步以氯仿/甲醇为洗脱液，硅胶柱层析法分离纯化自制的粗品卵磷脂，得到高纯度的纯白色固体卵磷脂。由薄层色谱定性检测，仅含一个斑点；用薄层扫描仪定量检测纯度大于97.4%项目步骤蛋黄卵磷脂的粗提首先将蛋黄均质放入带塞瓶中备用，称取10ml均质蛋黄放入洁净的带塞三角瓶中，加入两倍体积的95%乙醇，混合搅拌，离心5min（3000r/min)；取上清液，然后加入1/3乙醇用

3、量的乙醚，搅拌15min后，静置,接着过滤；滤渣进行二次提取，加入乙醇与乙醚的混合液(体积比为3:1)，无需搅拌静置浸渍；第二次过滤，合并二次液，在旋转蒸发器中60℃蒸馏至近干。加入一定量丙酮除杂，卵磷脂即沉淀出来，过滤，滤饼用丙酮冲洗几次，至到冲洗液无色，即得到卵磷脂粗品，在真空干燥箱中干燥后，充入氮气低温保存。柱层析分离纯化卵磷脂将适量的柱硅胶(60～100目)用氯仿打成浆状，湿法装柱，准确称量卵磷脂粗品(EPC)2.63g用尽可能少的氯仿溶解后，倒入柱子内。用不同浓度梯度的氯仿/甲醇混合液连续冲洗(氯仿:甲醇分别用40:1、35:1、30:1、25

4、:1、20:1、15:1、10:1、5:1、1:1、2:3、1:2、1:3)，每个浓度以100ml总量分批加入，当加入氯仿/甲醇浓度为1:1时，以后的溶液加入量根据需要变大，即洗脱液梯度变化要慢些。根据柱中色带及薄层层析不停的检测收集液的结果，分开收集各种不同成份的洗脱液，把出现单一斑点，且在同一块薄层板上与标品卵磷脂有同一Rf值的洗脱液收集在一起，然后旋转蒸发浓缩成膏状，再在冻干机上干燥，即得我们所期望的纯白色的卵磷脂精品，充入氮气低温保存。卵磷脂的检测利用薄层色谱为主要的定性检测手段，再利用薄层扫描仪，对所制得的卵磷脂样品进行定性和定量检测。将一定量

5、的硅胶G与一定量的浓度为0.4%～0.5%的CMC-Na溶液调匀制薄层板，根据不同的要求在活化好的板上点样。展开溶剂为氯仿:甲醇:水(65:25:4,V/V)。采用钼酸铵为显色剂，在130℃左右烘干显色。对卵磷脂标准品和样品的对应薄层斑点作光谱扫描图，确定以50nm为测定波长，灵敏度x=1，狭缝宽1.2×1.2，线性化Sx=3，作反射法锯齿扫描。谢谢观看