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时间:2022-01-09
《琥珀酸脱氢酶活性的测定》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、实验十五琥珀酸脱氢酶活性的测定Exp.15ActivityDeterminationofSuccinateDehydrogenase一、实验原理以脱氢方式使物质氧化的酶,称脱氢酶。琥珀酸脱氢酶(succinatedehydrogenase)是三羧酸循环中的一个酶,能促使琥珀酸脱氢成为反丁烯二酸,并将脱下的氢传递给受氢体。用甲烯兰作受氢体,结果甲烯兰被氢还原生成无色的甲烯白。COOHHCCH2CH2COOH+MBHOOCCH+MB·2H琥珀酸反丁烯二酸COOH在无氧环境下,琥珀酸脱氢酶的活性与甲烯兰脱色的速度成正比,使定量甲烯兰脱色所需时间的倒数,可以用来表示酶的活性。本实验
2、用液态石蜡制造无氧环境,这样可以不用真空设备或氮气。二、实验用品1、材料新鲜肌肉糜2、试剂(1)0.01%甲烯兰溶液;(2)0.02M琥珀酸溶液(3)液态石蜡;3、仪器设备试管及试管架、恒温水浴锅、1毫升及2毫升的吸量管、烧杯。三、方法和步骤取2支试管,各加0.02M琥珀酸溶液0.5毫升,0.01%甲烯兰溶液1毫升和液态石蜡溶液2毫升。再分别加入0.5克肌肉糜和煮过的肌肉糜分别混匀后,将试管放入37℃水浴中保温,随时观察并记录甲烯兰脱色过程和时间,酶活力=1/时间。四、实验结果37℃水浴中保温随时观察并记录甲烯兰脱色过程和时间,酶活力=1/时间五、思考题1.琥珀酸脱氢酶活性
3、的测定的原理是什么?2.实验过程中要注意哪些问题?3.酶活性测定的方法有哪些?
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