hiv-1_p24抗原elisa检测试剂盒说明书

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1、HIV-1p24抗原ELISA检测试剂盒说明书本试剂盒采用夹心法原理检测人血清/血浆、培养物上清中的HIV-1p24抗原，预先采用p24单克隆抗体包被固相微孔板。若样本中含有HIV-1p24抗原，则与包被板结合，再加入生物素（Biotin，Btn）标记p24多克隆抗体，反应后再加入辣根过氧化物酶标记的亲和素（SA-HRP），结合形成夹心复合物，洗涤除去未结合的酶标记物，加入HRP底物液，读数测量，根据临界值判断样本中是否含有HIV-1p24抗原。[试剂组分]1.包被板：包被有抗HIV-1p24抗体的96孔酶标板，2～8℃保存。2.阴性对照：1.0mL/瓶；含正常人血清，防腐剂和色素，

2、2～8℃保存。3.P24抗原阳性对照：1.0mL/瓶×1瓶；含基因工程P24抗原的人血清，防腐剂和色素，2～8℃保存。4.结合物1：含有生物素标记的P24多克隆抗体（Btn-P24抗体）5.结合物2：含有辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素（SA-HRP）6.底物液A：7.底物液B：8.终止液：9.浓缩洗涤液：10.封板膜：11.说明书：1份。[操作程序]1．实验设计：将包被板从密封袋中取出，根据所需数量在板架上放好微孔板条。设空白对照一孔，阴性对照两孔，P24抗原阳性对照2孔，HIV抗体阳性对照2孔。2．加结合物1：每孔加入结合物125μL。3．加样：依次加入样品、阴性对照、P24抗原阳

3、性对照75μL。4．温育：用微量震荡器充分振荡混匀，用封板膜封盖反应板，37℃温育60分钟；5．洗板：撕去封板膜，吸干微孔板中所有液体，每孔加入稀释好的洗涤液400μL，浸泡至少30秒，吸干。如此洗板5次，最后在干净的吸水纸上拍干。6．加酶：空白孔除外，每孔加入结合物2100μL。7．温育：用新的封板膜封盖反应板，37℃温育30分钟。8．洗板：撕去封板膜，如上述洗板方法洗涤5次，最后在干净的吸水纸上拍干。9．加底物液：每孔加入底物液A50μL，底物液B50μL，用微量震荡器充分振荡混匀，37℃避光温育15分钟。10．加终止液：每孔加入终止液50μL。11．检测：双波长测量本试剂盒仅供

4、科研使用