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时间:2021-09-30
《实验六、细胞凝集反应『目要求』1、掌握细胞凝集反应.ppt》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、实验六、细胞凝集反应『目的要求』1、掌握细胞凝集反应的原理。2、掌握细胞凝集的实验方法。『实验用品』光学显微镜、离心机、载玻片、生理盐水、PBS液、土豆块茎、兔血红细胞(无细胞核)『实验原理』凝集素是一类含糖(少数例外)并能与糖专一结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。在细胞膜的表面,组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖链,形成细胞外被(又称为糖萼)。凝集素能与细胞外被中的糖分子链接,在细胞间形成“桥”,从而引起细胞凝集。大多数凝集素存在于储藏器官内,作为一种氮源。『实验内容和方法』一、2%兔血红细
2、胞制备:1ml兔血加入5ml生理盐水,2000r/min,5分钟离心2次后,按照红细胞体积比配制2%兔血红细胞悬液。二、土豆块茎:1、提取凝集素:称取土豆去皮块茎4g,加少许磷酸缓冲液研磨成匀浆,最终加到30ml磷酸缓冲液,浸泡2h,浸出的粗提液含有可溶性土豆凝集素。2、测定血凝活性:一滴2%兔血红细胞悬液和一滴凝集素粗提液,静置15分钟于低倍镜下观察。3、用磷酸缓冲液作为对照:一滴2%兔血红细胞悬液和一滴磷酸缓冲液,静置15分钟于低倍镜下观察。4、实验绘图显微镜下显示兔血红细胞的凝集现象+-凝集素10×
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