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时间：2021-10-02
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1、--翻开主页后，选择Gene，然后在后面输入目的基因名，基因后面可以加空格然后加种属缩写，不知道种属缩写也可以不加点击Search..word.zl--找到目的基因，注意后面标记的种属，然后点基因名进入下一页面后，向下拉，直到mRNAandProtein，点击红框数字..word.zl--向下拉复制序列，然后另翻开NCBI主页，点红框Blast..word.zl--向下翻到specializedblast，点Primer-Blast..word.zl--注意为FASTAsequence，因此在第一行键入>ACTB〔ACTB为目的基因名〕，然后回车，粘贴刚刚复制的序列..word.
2、zl--将上图红框数字改成下列图数字继续..word.zl--..word.zl--上图红框可以选上，但如果选上得不到结果，就可以不选。以上两步都是为了防止DNA污染。其它都可以不改，然后点GetPrimers需要运行几十秒，得到10对引物后进展选择，最好GC百分比在45%-55%之间，Tm在60℃左右。..word.zl
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