杆状病毒介绍-23页

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1、杆状病毒之公保含烟创作关键词：昆虫病毒，杆状病毒，核型多角体病毒，颗粒体病毒，质型多角体病毒杆状病毒是一类在自然界中专一性感染节肢植物的DNA病毒，病毒粒子呈杆状，基因组为双链环状DNA分子，DNA以超螺旋形式压缩包装在杆状衣壳内，年夜小在90～180Kb之间.目前杆状病毒作为高效、平安的无公害生物虫剂普遍应用于益虫防治.杆状病毒只来源于无脊椎植物，虽然已发现600多种杆状病毒，但停止分子生物学研究的不到20种.杆状病毒的基因组为单一闭合环状双链DNA分子，年夜小为80～160kb，其基因组可在昆虫细胞核复制和转录.DNA复制后组装在杆状病

2、毒的核衣内，后者具有较年夜的柔韧性，可容纳较年夜片段的外源DNA拔出，因此是表达年夜片段DNA的理想载体.其中，用作外源基因表达载体的杆状病毒，目前仅限于核型多角体病毒(nuclearpolyhedrosisvirus，NPV).该病毒颗粒在细胞内可由多角体卵白包裹形生长度约1~5m的包括体病毒，呈多角体形状.核型多角体病毒有两种形式：一种为包括体病毒(occludedvirus，OV)，另一种则为细胞外芽生病毒(buddedvirus，BV).它们在病毒感染中饰演的角色分歧，包括体病毒是昆虫间水平感染的病毒形式，昆虫往往是食入污染OV的食

3、物后引起感染.包括体病毒外层裹了一层卵白晶体，即为29000的多角体卵白，它对病毒的水平感染起以下作用：①呵护病毒颗粒在外界传达进程中免遭环境因素的破坏而失活.②担保病毒颗粒在适当的位置释放，引起感染.昆虫中肠上皮局部的强碱性环境(pH=10.5)，可使病毒颗粒释放卵白酶溶解多角体.BV病毒是集体内细胞间的感染形式，由细胞芽生出BV，进入血淋巴系统中感染其它部位的细胞或直接在临近细胞内感染.近几十年，有关杆状病毒基因构造、功用和表达调节的研究停顿迅速，其中研究最深入的是mùxu苜蓿银蚊夜蛾(autogra—phacalifornica)多核

4、型多角体病毒(multiplenuclearpolyhedro-sisvirus，MNPV)，简称AcMNPV或AcNPV.该病毒是杆状病毒科Baculoviridae的原型，是一种年夜的、带外壳的双链DNA病毒，能感染30多种鳞翅目昆虫，被普遍用作基因表达系统载体.其它作为表达载体的杆状病毒，主要是来自家蚕的NP~(bombyxmoil，BmNP~).由于家蚕幼虫体内系统适合年夜规模地制备生产外源卵白，且本钱低，显示出良好的应用前景.本文主要介绍AcNPV病毒，BmNPV在许多方面与其具有共同的特征.AcNPV的基因表达分为4个阶段：立刻

5、早期基因表达、早期基因表达、晚期基因表达和极晚期基因表达.前两个阶段的基因表达早于DNA复制，然后两个阶段的基因表达则陪伴着一系列的病毒DNA分解.其中在极晚期基因表达进程中，有两种高效表达的卵白，它们是多角体卵白和P10卵白：多角体卵白是形成包括体的主要成分，感染前期在细胞中的积聚可高达30％~50％，是病毒复制非必需成分，但对病毒粒子却有呵护作用，可使之坚持稳定和感染能力另一类高效表达的极晚期卵白为P10卵白，也是一类病毒复制非必需成分，可在细胞中形成纤维状物质，能够与细胞溶解有关.多角体基因和P10基因现在都已被定位和克隆这两个基因的

6、启动子具有较强的启动能力，因此这两个基因位点成为杆状病毒表达载体系统理想的外源基因拔出位点.1.杆状病毒基因组的构造和功用研究杆状病毒基因组为双链环状DNA分子.DNA以超螺旋方式被压缩包装在杆状核衣壳(rod.shapednueleocapsid)内，核衣壳包被脂质卵白囊膜(envelope)后形成病毒粒子.核衣壳包括衣壳(capsid)卵白和髓核(COle).其中衣壳卵白是杆状病毒粒子的主要构造卵白；髓核由病毒DNA分子和与其密切相关的碱性卵白构成.碱性卵白同DNA严密结合以维持其复杂有序的超螺旋构造.目前已知基因组全序列的杆状病毒有苜

7、蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)b]、家蚕核多角体病毒(BmNPV)、黄杉毒蛾多核衣壳核多角体病毒(OpMNPV)、舞毒蛾多核衣壳核多角体病毒(LdMNPV)、甜菜夜蛾多核衣壳核多角体病毒(SeMNPV)、棉铃虫核型多角体病毒(HaNPV)，以及斜纹夜蛾核型多角体病毒(SphMNPV).目前AcMNPV基因组的研究最为深入，它是双链超螺旋年夜分子环状DNA，其年夜小为90～160kb，约编码154个基因.AcMNPV基因组的基因组织(geneorganization)较为复杂，基因组的分歧区域具有功用分化，基因的散布尚无规律可循，但

8、AcMNPV基因组含有8个同源区，每区含有不等的重复或倒置重复序列，这些重复序列由位于中间的不完整回文序列及其两侧各约20bp的序列构成.同源区是杆状病毒基因组普通存在的功用域构